一、地高辛标记探针检测重组双功能水蛭素中的DNA残留量（论文文献综述）
汪洁,卢雪梅,黄演婷,金小宝,朱家勇[1]（2014）在《地高辛探针检测重组肝靶向干扰素宿主DNA残留量的研究》文中研究说明目的:建立检测重组肝靶向干扰素宿主DNA残留量的方法,根据此法检测3批重组肝靶向干扰素每人份剂量宿主DNA残留量。方法:以重组肝靶向干扰素工程菌基因组DNA为模板,并制备探针,用此标记探针对3批重组产品进行DNA残留量检测。结果:3批次重组肝靶向干扰素原液每人份剂量宿主DNA残留量均小于10 ng。结论:地高辛标记探针斑点杂交检测DNA残留量具有特异性强,灵敏度高,重现性好,操作简单,能快速高效检定重组肝靶向干扰素原液并对其制备过程进行质量监控。
王淼[2]（2009）在《地高辛标记探针检测重组人干扰素α2b中DNA残留量的研究》文中进行了进一步梳理目的建立检测注射用重组人干扰素α2b半成品中外源性DNA残留量的方法。方法以重组人干扰素α2b工程菌基因组DNA为模板,用地高辛标记探针,以此探针杂交并进行显色反应。结果半成品中每人份剂量的外源性DNA残留量均小于10 ng。结论该方法检测特异性较强,操作较安全简便,可用于重组人干扰素α2 b制备过程中的质量监控及半成品的检定。
潘红春[3]（2006）在《重组蛋白hCH-2的PEG修饰及其初步特性研究》文中指出蛋白药物的PEG修饰是第二代生物制药的重要内容,PEG修饰蛋白药物克服了天然蛋白药物的诸多不足,而被赋予了低免疫原性、高酶稳定性、长半衰期等新特性,已逐渐成为临床上广泛应用的新一代高效、低毒的治疗药物。本项目完成了PEG修饰hCH-2项目临床前的大部分基础研究工作,选择了合适的PEG修饰剂,优化并放大验证了修饰工艺和纯化工艺,获得了单链PEG-hCH-2目标产物,建立了单链PEG-hCH-2原液生产的质控方法和质量标准,探索了单链PEG-hCH-2的初步特性,为开发hCH-2的长效PEG修饰药物奠定了基础。具体内容主要包括以下几个方面:（1）利用高效液相色谱技术,建立了一种快速、方便、准确和稳定的定量检测PEG修饰反应液中微量PEG-hCH-2和hCH-2的反相高效液相色谱方法。该方法的分离基础为PEG化hCH-2疏水性的改变,色谱柱为C8反相柱（250mm×4.6mm,300?,5μm）,流动相A为水-TFA（999∶1）,流动相B为100%乙氰,流速为1.0ml/min,线性梯度洗脱和等度洗脱相结合,柱温为30℃,检测波长为280nm。在0.049-0.456mg/ml和0.112-1.796 mg/ml浓度范围内,PEG-hCH-2和hCH-2的浓度与色谱峰峰面积均呈现良好线性关系,回归方程分别为y=2.11×106x-3.30×104和y=1.08×106x-8.45×103,线性相关系数r分别为0.9997和1.0000,最低检测浓度分别为0.044 mg/ml和0.056 mg/ml,日内和日间RSD（n=6）分别为0.50-2.18%和0.40-2.21%。平均回收率分别为98.01% （n=3,RSD为0.72-2.62%）和97.80% （n=3,RSD为0.56-2.32%）。本方法克服了常用的SDS-PAGE、SPF、TNBS等方法的重现性、精度差以及检测时间长等不足,完全可用于工业化大生产质量控制过程中PEG-hCH-2的测定。（2）根据hCH-2本身的结构特性,选择分子量为20kD的链式琥珀酸琥珀酰亚胺酯类mPEG对hCH-2分子中赖氨酸的ε氨基和/或N末端氨基进行非定点PEG修饰。通过PEG修饰hCH-2的单因素影响研究,获得较适宜的起始pH值为8.0-8.5、摩尔比为1:5、缓冲液浓度为25-50mmol/l、hCH-2浓度为0.5mg/ml和反应时间为4h;利用L9（34）正交试验对起始pH值、hCH-2与PEG的摩尔比、hCH-2浓度和缓冲液浓度进行了优化,获得优化的起始pH值为8.5、hCH-2与PEG的摩尔比为1:7、hCH-2浓度为0.75mg/ml和缓冲液浓度为50mmol/l;保持温度25℃、反应时间4h、反应总体积0.5ml和转速200r/min,进行优化修饰条件的验证试验研究和放大试验研究,结果表明:优化的PEG修饰工艺条件具有良好的稳定性和可操作性,可使反应液中单链PEG-hCH-2含量可达0.25mg/ml,单链PEG-hCH-2修饰
蔡旭,马端,刘康达,宋后燕[4]（2004）在《地高辛标记探针检测重组双功能水蛭素中的DNA残留量》文中研究指明为检测注射用重组双功能水蛭素半成品中的DNA残留量 ,应用地高辛标记重组双功能水蛭素工程菌DNA ,并以此为DNA探针进行点杂交 ,同时做特异性及灵敏度实验。结果证明 ,该方法检测最低限值可达1pg ,且重复性好 ,特异性强 ,操作较简便 ,可用于双功能水蛭素制备工艺的质控及半成品的检定
二、地高辛标记探针检测重组双功能水蛭素中的DNA残留量（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、地高辛标记探针检测重组双功能水蛭素中的DNA残留量（论文提纲范文）
（1）地高辛探针检测重组肝靶向干扰素宿主DNA残留量的研究（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 制备重组肝靶向干扰素宿主菌DNA |
| 1.2.2 制备小片段DNA |
| 1.2.3 重组肝靶向干扰素RNA的制备 |
| 1.2.4 地高辛标记探针的制备 |
| 1.2.5 地高辛标记探针检测标记效率 |
| 1.2.6 地高辛标记探针特异性测定 |
| 1.2.7 样品的处理 |
| 1.2.8 肝靶向干扰素外源性DNA残量的检测 |
| 1.2.9 重现性考察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 工程菌基因组DNA |
| 2.2 HaeⅢ酶切基因组DNA |
| 2.3 检测地高辛标记探针效率 |
| 2.4 地高辛标记探针的特异性 |
| 2.5 检测肝靶向干扰素原液外源性DNA残留量 |
| 2.6 重现性试验 |
| 3 讨论 |
（2）地高辛标记探针检测重组人干扰素α2b中DNA残留量的研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 工程菌基因组DNA的制备 |
| 1.3 探针的制备 |
| 1.4 探针标记效率的检测 |
| 1.5 样品的处理 |
| 1.6 外源性DNA残留量的检测 |
| 1.7 重现性试验 |
| 2 结果 |
| 2.1 工程菌基因组DNA |
| 2.2 探针标记效率的检测 |
| 2.3 重组人干扰素α2 b半成品中外源性DNA残留量的检测 |
| 2.4 重现性试验 |
| 3 讨 论 |
（3）重组蛋白hCH-2的PEG修饰及其初步特性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 绪论 |
| 1.1 问题的提出及研究意义 |
| 1.2 蛋白质药物PEG 修饰的国内外研究现状 |
| 1.3 本文研究的目的和研究内容 |
| 2 PEG 化重组蛋白hCH-2 含量HPLC 测定的方法建立 |
| 2.1 概述 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 重组蛋白hCH-2 的PEG 修饰工艺研究 |
| 3.1 概述 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 PEG 化重组蛋白hCH-2 的分离纯化工艺研究 |
| 4.1 概述 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 PEG 化重组蛋白hCH-2 的质控方法和质量标准研究 |
| 5.1 概述 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.4 本章小结 |
| 6 PEG 化重组蛋白hCH-2 的初步特性研究 |
| 6.1 概述 |
| 6.2 实验部分 |
| 6.3 实验结果 |
| 6.4 本章小结 |
| 7 全文结论与展望 |
| 7.1 主要结论 |
| 7.2 后续研究工作展望 |
| 附件1.2 蛋白质药物PEG 修饰的国内外研究现状 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 1 本文主要缩写词 |
（4）地高辛标记探针检测重组双功能水蛭素中的DNA残留量（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 工程菌DNA的制备 |
| 1.2.2 重组双功能水蛭素RNA的制备 |
| 1.2.3 DIG-工程菌DNA探针的制备 |
| 1.2.4 DIG-工程菌DNA探针的鉴定 |
| 1.2.5 重组双功能水蛭素样品的处理 |
| 1.2.6 DIG-工程菌DNA探针的灵敏度, 特异性实验 |
| 2 结 果 |
| 2.1 DIG标记工程菌DNA探针的鉴定 |
| 2.2 DIG-工程菌DNA探针的灵敏度和特异性 |
| 2.3 注射用重组双功能水蛭素半成品的残留DNA检测 |
| 3 讨 论 |
四、地高辛标记探针检测重组双功能水蛭素中的DNA残留量（论文参考文献）
- [1]地高辛探针检测重组肝靶向干扰素宿主DNA残留量的研究[J]. 汪洁,卢雪梅,黄演婷,金小宝,朱家勇. 生物技术, 2014(05)
- [2]地高辛标记探针检测重组人干扰素α2b中DNA残留量的研究[J]. 王淼. 广东药学院学报, 2009(01)
- [3]重组蛋白hCH-2的PEG修饰及其初步特性研究[D]. 潘红春. 重庆大学, 2006(05)
- [4]地高辛标记探针检测重组双功能水蛭素中的DNA残留量[J]. 蔡旭,马端,刘康达,宋后燕. 药物生物技术, 2004(06)