一、动物饲料中克伦特罗的气质色谱法测定研究（论文文献综述）
孙铭雪[1]（2021）在《表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇》文中研究表明克伦特罗（Clenbuterol,CLB）和沙丁胺醇（Salbutamol,SAL）属于β2-肾上腺受体激动剂,通常被称作“营养重分配剂”或是“瘦肉精”,因其具有营养再分配、改变动物体内物质的代谢途径,加速蛋白质的合成,显着提高食品动物的生长速度等生理作用,经常被非法用作饲料添加剂用于畜产品养殖业中来谋取利益。当动物体内残留的β2-受体激动剂通过食物链进入人体后,会对食用者产生一定的毒副作用,导致中毒现象。目前,我国和欧盟等许多国家已颁布了多部法律法规明确规定不允许将β2-受体激动剂作为动物饲料添加剂。因此,为加强食品安全监管,保障广大消费者的生命安全和利益,急需在现有的方法上建立更加快速、可靠的β2-受体激动剂检测方法。现有的确证检测方法有色谱法、常规酶联免疫法等,但其因前处理麻烦、操作复杂、检测时间较长等原因,无法实现实际样品的高通量检测。如今,由于具有灵敏度高、干扰小、检测速度快等优点,表面等离子体传感器在β2-受体激动剂的检测中具有重要的应用前景。本研究以克伦特罗和沙丁胺醇为检测目标物,首先制备了CLB和SAL单克隆抗体。将CLB-BSA和SAL-OVA作为实验中所需要使用的免疫原,取6-8周龄的雌性BALB/c小鼠,用选取的免疫原首先对小鼠进行免疫。对免疫后的小鼠进行血清效价检测,检测结果最好的小鼠说明其免疫效果最好,选取免疫效果最好的小鼠,脱颈处死后取其脾细胞,将脾细胞和复苏后的骨髓瘤细胞融合在一起,经间接ELISA法挑选出阳性细胞,再对连续三次检测呈阳性的细胞进行亚克隆,得到高效价、具有特异性且能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用诱生腹水法进行腹水制备,将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内产生腹水的方法收集抗体。对单抗的性质进行鉴定,得到CLB单克隆抗体腹水效价为1:4.50×106,SAL单克隆抗体效价为1:3.40×105;使用间接竞争ELISA法对两种单克隆抗体的特异性鉴定结果显示,CLB单抗对克伦特罗的IC50为2 ng/m L,对莱克多巴胺和沙丁胺醇等药物的IC50均大于10000,交叉反应率小于0.2%,SAL单抗对沙丁胺醇的IC50为2.5 ng/m L,在对其他几种药物的检测中发现,此抗体对克伦特罗的IC50为11.3 ng/m L,计算得二者的交叉反应率为22%,而对其他药物的交叉反应率仍小于0.2%。本研究建立了直接检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇的SPR免疫传感器法。以氨基偶联法修饰CM7芯片,将抗体固定在芯片上,优化抗体偶联条件,以10 m M p H 5.0醋酸-醋酸钠缓冲液为耦合缓冲剂,EDC和NHS以1:1的比例混合活化芯片,活化时间为15 min,抗体反应时间为20 min,用乙醇胺溶液封闭芯片,封闭时间为15 min。采用直接检测法,将牛尿离心、过膜处理后,流过固定了抗体的CM7芯片来构建标准曲线,进行检测。经方法学验证,克伦特罗的标准曲线的线性范围在0.1～6 ng/m L之间,得到的最低检测限（LOD）为0.05 ng/m L。在1 ng/m L～5 ng/m L添加浓度范围内,牛尿中克伦特罗的平均回收率为82.46%～98.60%,批内变异系数为1.67%～8.50%,批间变异系数为2.61%～10.14%。以相同的方法对沙丁胺醇进行测定,在0.1～6 ng/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,LOD为0.01 ng/m L,在1 ng/m L～5 ng/m L添加浓度范围内,牛尿中沙丁胺醇的平均回收率为87.82%～91.67%,批内变异系数为1.51%～2.67%,批间变异系数为2.67%～5.53%。采用UPLC-MS/MS法和SPR生物传感器法对牛尿样品中CLB和SAL的含量进行对比,结果表明SPR方法可用于动物中克伦特罗和沙丁胺醇的检测。
赵璐瑶,杨曙明,王济世,薛佳俐,刘瑞,刘倩,刘晓夏,王彦云,赵汝婷[2]（2020）在《农产品中β2-激动剂检测技术研究进展》文中研究表明农产品中β2-激动剂类药物的违禁使用给消费者的人身健康及我国进出口贸易带来了严重危害,相关部门已经建立了很多种监管方法,如色谱质谱联用法、酶联免疫法、传感器法等。本文综述了近年来国内外报道的农产品中β2-激动剂检测方法和研究进展,拟为相关部门实现对β2-激动剂类药物更有效地监督提供借鉴,切实保障消费者人身安全。
王瑞[3]（2020）在《牛奶中β-受体激动剂和β-阻断剂类药物多残留检测方法的研究》文中指出β-受体激动剂类和β-受体激动剂类药物是具有苯乙醇胺结构的肾上腺素类合成药物,临床上分别用于治疗呼吸系统和心血管系统疾病。然而,在畜牧业养殖中常被非法用于促进动物生长,导致在动物组织中残留,对人体健康造成威胁。所以,对β-受体激动剂和β-受体阻断剂类兽药残留的检测是动物源性食品安全的关键环节,但是部分新型药物仍缺少相关检测方法。本研究拟建立同时测定牛奶中卡布特罗、沙丁胺醇、克伦丙罗、莱克多巴胺、克伦特罗、福莫特罗、克伦潘特、马布特罗、丙氧苯酚胺、班布特罗、马喷特罗、苯乙醇胺A、喷布特罗和沙美特罗等14种β-受体激动剂和阿替洛尔、索他洛尔、β-羟甲基美托洛尔、噻吗洛尔、醋丁洛尔、美托洛尔、左布诺洛尔、塞利洛尔、氧烯洛尔、比索洛尔、卡拉洛尔、普萘洛尔、阿普洛尔、丁呋洛尔、贝凡洛尔、奈必洛尔等16种β-受体阻断剂类药物的多残留检测方法。1.建立和优化测定30种β-受体激动剂和β-受体阻断剂类药物的UPLC-MS/MS检测方法。分别对锥孔电压、碰撞能量、母离子、子离子等质谱条件进行优化,对流动相组成和比例、梯度洗脱条件等色谱条件进行优化。确定采用Waters Acquity UPLCTMCSH C18（2.1*100 mm,1.7 μm）色谱柱进行分离,乙腈和0.1%甲酸水为流动相,采用梯度洗脱方式进行分离,流速为0.3 mL/min;ESI源正离子模式进行多反应监测,外标法定量。获得各化合物的质谱检测参数,30种待测物可在9.0 min内得到了很好的分离和确证。2.对牛奶样本中30种待测物的样本前处理技术进行优化。分别对提取溶液、酶的用量、pH和温度与提取时间、固相萃取柱的选择、淋洗和洗脱条件进行优化。确定用乙酸调节牛奶pH至5.2,经30μLβ-葡萄糖醛苷酸酶/芳基硫酸酯酶37℃震荡过夜水解,用3%（v/v）乙酸乙腈溶液经涡动、震荡、离心提取上清液,氮气吹干有机相,提取液经MCX柱上样,经水和甲醇淋洗,5%氨化甲醇洗脱,40℃氮气水浴吹至近干,1 mL0.1%（v/v）甲酸水-乙腈（9:1,v/v）复溶。3.系统考察了同时测定牛奶中30种β-受体激动剂和β-受体阻断剂类药物的UPLC-MS/MS方法学指标。评价了线性关系、检出限、定量限、准确度、精密度、基质效应、稳定性等考核指标。实验得出,各药物在0～50 μg/L质量浓度范围内线性关系良好,相关系数（r2）均≥0.991;检测限为0.1～0.2 μg/L,定量限为0.3～0.5 μg/L;在LOQ、2倍LOQ、10倍LOQ三个加标浓度下,各药物平均回收率61.36%～88.72%,71.49%～103.69%;67.72%～99.07%;批内 RSD 分别为 3.75%-17.92%,2.76%-17.52%,3.42%-16.04;批间 RSD 分别为 1.43%～17.62%,4.1 1%～16.43%,3.52%～16.67%;通过空白样液加入标准品校正基质效应的影响,基质效应率在29.1%～151.2%范围内;分别储存牛奶样品于-20℃和4℃下各7d,在-20℃下平均回收率为74.80-105.24%,变异系数为1.73-15.93%、4℃下平均回收率为72.18-94.78%,变异系数为3.80-16.68%,各药物未见降解,稳定性好。该方法分析时间短,定性定量可靠,可用于牛奶中30种β-受体激动剂类和β-受体激动剂类药物残留检测。综上所述,本研究为了对牛奶中β-受体激动剂和β-受体阻断剂类药物多残留分析,通过优化液相色谱的分离条件、质谱的检测条件、提取溶剂的选择、酶解环境的pH、温度、时间和用量等条件来提高各药物的回收率,进行方法学验证,从而建立准确可靠的UPLC-MS/MS测定牛奶中30种β-受体激动剂类和β-受体阻断剂类药物残留的分析方法。该方法可在9.0 min内对30种药物进行准确的定性和定量分析,操作简单,快速,检测限低,灵敏度高,重复性好,结果可靠。
李良[4]（2019）在《巯烯加成制备液相色谱固定相及其在手性对映体分析中的应用研究》文中研究指明手性选择法则是生命系统的自然属性之一,蛋白质、核酸等许多生命物质都是手性的。手性药物和农药进入人体后,对映体在药效、毒理和代谢途径的不同,这与人们的身体健康息息相关。研制高效手性分离材料,并用于建立快速、灵敏、准确的对映体含量测定的LC-MS/MS新方法,有利于更科学地评价对映体的安全性。本论文基于“巯-烯”加成点击化学反应,发展了制备环糊精、替考拉宁和纤维素手性固定相的新方法,在表征固定相结构的基础上,较系统地评价了新固定相的手性色谱性能,并用于实际样品的分析,分别建立了人尿中和食品中相关手性标志物、手性农药和非法手性添加剂对映体测定的LC-MS/MS新方法,对保障食品和药品安全具有重要的研究意义和应用前景。本论文主要包含以下几方面的研究工作:1.首先回顾了前人已发展的各类手性拆分手段和基本原理,重点介绍应用较为广泛的高效液相色谱手性固定相的发展过程和各自的特点,并涉及到有序介孔材料作为色谱键合材料的应用进展。以此作为开展本论文研究工作的理论依据和出发点。2.利用6-氨基-β-环糊精与活泼的异氰酸苄基酯反应合成苄基脲-β-环糊精,随后引入双键,基于“巯-烯”加成反应将其键合到硅胶表面,得到一种新型的苄基脲-β-环糊精键合相（BzCDP）。经结构表征后,成功地用于人尿中苯和甲苯暴露的生物标志物苯巯基尿酸（PMA）和苄巯基尿酸（BMA）对映体的同时手性拆分和定量分析,首次证实人体代谢中的生物标志物是以两种对映体的形式存在。在30min内BzCDP能快速拆分PMA和BMA对映体,分离度达到2.25和2.14。采用同位素标记的PMA内标（d2-PMA）,通过负离子多反应监测（MRM）,建立了一种同时定量测定PMA和BMA对映体含量的LC-MS/MS新方法。该方法的线性范围为0.5～250μg L-1,回收率大于82%,检出限（LODs）低于0.17μg L-1,日内和日间平均相对标准偏差（RSDs）均小于13.1%。该方法成功地应用于60名油漆工和印刷工的尿液检测,结果显示阳性尿液中两种标志物均以不同含量的对映体形式存在,例如L-PMA(27.5～106μg L-1)和D-PMA(19.9～82.8μg L-1),表明苯污染较严重,应高度关注该群体的职业健康。这将有助于更科学地评价苯及苯系物对人类的危害性。3.基于“巯烯”加成反应,制备了一种S-（-）-2-苄基氨基-1-苯乙醇单衍生化-β-环糊精键合相（Bz CSP）,并进行了基本结构表征。通过引入芳基和手性中心,进一步地提高了环糊精类固定相的手性分离能力,拓宽手性分离范围,增强固定相的实用性。利用环酮类药物、三唑类农药、含胺基药物、氨基醇类药物四种类型22种不同结构特征的手性化合物作探针,评价其手性色谱性能。研究发现,新固定相适用于多种色谱模式（正相、反相、极性有机）。反相模式能拆分大多数化合物,其中环酮类药物的分离度高达5.33,三唑类农药的分离度可达2.05,分析时间较短。部分化合物只能在正相模式拆分,例如华法林的Rs达2.46,苯霜灵的Rs高达8.7,而且发现S-（-）-2-苄基氨基-1-苯乙醇衍生化固定相比相应的R（+）-固定相拆分能力强,可能是由于S（-）-比R（+）-固定相与溶质间“三点”作用更匹配,有利于手性分离。此外,采用该新固定相还在极性有机模式下成功地拆分了普萘洛尔等治疗心血管类疾病的常用手性药物,分离度可达1.53。表明通过“巯烯”加成反应制备的固定相是一类新型的多模式固定相,具有较好的开发价值。为验证新的Bz CSP的实用性,还建立了测定5种果蔬中3种手性农药已唑醇、戊唑醇、灭菌唑对映体残留量的LC-MS/MS新方法。所建立的方法具有选择性好、灵敏度高、抗基质干扰强、重现性好等特点。目前,国内外仍以非手性农残检测方法研究为主,尚缺乏手性农药对映体分析测定方法的系统性研究。4.首次报道通过“巯-烯”加成反应制备替考拉宁键合手性固定相（TCSP）的新方法。首先对替考拉宁进行甲基丙烯酸酯化,然后使不饱和的丙烯酸酯和巯丙基硅胶进行“巯-烯”加成反应制备TCSP。该制备方法反应条件温和,键合量较高,成本低,尚未见相关报道。以优化的极性有机流动相（甲醇/乙腈/甲酸铵/乙酸,480/120/0.3/0.04,v/v/m/v）流速为0.5 m L min-1,在35°C柱温下,20min内同时实现了克伦特罗（CLEN）和沙丁胺醇（SAL）对映体的高效分离,分离度（Rs）分别为2.72和1.91。固相萃取后,通过正离子多反应监测（MRM）建立了一种可用于200份动物源肉类样品中β2-激动剂CLEN和SAL对映体快速灵敏的LC-MS/MS定量方法。分别研究了该方法的精密度、准确度、稳定性、线性、检出限和基质效应。该新方法在0.5～50μg L-1浓度范围内对所有对映体均有良好的线性关系（r≥0.995）,较高的回收率（CLEN为87～103%,SAL为93～103%）和高的重现性（日内RSDs%在2.65～7.98%,日间在4.23～9.29%）。CLEN和SAL的对映体LODs分别低于0.018μg kg-1和0.076μg kg-1。结果表明,所有阳性样品均含有不等量的对映异构体,尤其是猪肝中的R/S异构比高达1.3,这表明β2-激动剂在动物体内有对映体选择性代谢,所以科学评估激动剂对人类的毒性需要精准到对映体含量的测定。5.通过“巯-烯”加成反应制备了一种新型的3,5-二氯苯基氨基甲酸酯化纤维素键合相（CELCSP）。首先将烯基引入到纤维素上,然后用3,5-二氯苯基异氰酸酯将纤维素完全异氰酸酯化。最后使烯基与3-巯丙基硅胶反应获得一种纤维素键合固定相。通过红外光谱、核磁共振波谱和元素分析对配体和固定相的结构进行了表征。新制备的纤维素键合相耐溶剂性能强,可用于反相色谱并兼容ESI-MS,已成功用于六种常见的手性杀菌剂的对映体拆分,其中包括灭菌唑、己唑醇、戊唑醇、三唑酮、甲霜灵和苯霜灵。使用常见的0.1%甲酸-乙腈作为流动相,上述杀菌剂对映体在CELCSP上的分离度（Rs）和选择性因子（α）分别达到3.46和1.27。基于CELCSP色谱柱建立了一种新的LC-MS/MS方法,在30min内定量测定10种水果和蔬菜（如黄瓜、葡萄等）中的所有6种手性杀菌剂对映体。样品经Fe3O4磁性粒子快速前处理,通过LC分离对映体和正离子多反应监测质谱测定。在0.10～100μg L-1的范围内观察到响应与对映体浓度之间的良好线性关系（γ=0.9965～0.9982）。水果和蔬菜的平均回收率在65%至110%之间（n=3）。对映体的检出限（LODs）和定量限（LOQs）分别为0.05～0.61μg kg-1和0.18～2.01μg kg-1。样品中重复测定的相对标准偏差分别为1.2%～6.0%（日内,n=5）和2.5%～13.0%（日间,n=10）。“巯-烯”加成的温和反应条件有利于维持纤维素的有序立体结构,而高定向合成的产率也可以提供足够的手性配体键合量,为LC-MS/MS监测农药对映体残留量建立可靠的食品安全分析方法提供了保证。
陈清平[5]（2019）在《水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法的研究》文中进行了进一步梳理β-受体激动剂是一类具有苯乙醇胺结构的药物,广泛用于治疗支气管疾病。一系列动物实验表明在动物饲养中当β-受体激动剂用药量超过推荐治疗剂量的510倍时可提高饲料转化率,促进动物生长,因此曾被广泛滥用于动物饲养过程。β-受体激动剂在动物体内造成蓄积性残留,通过食物链进入人体。人类食用β-受体激动剂残留量较高的动物源性食品后对肾脏、肝脏等器官均产生毒副作用,出现肌肉震颤、疼痛、心悸等中毒症状,严重危害人类健康。因此需要对食品中β受体激动剂残留进行监控,以确保动物源性食品的质量安全。目前对β-受体激动剂的检测研究对象多集中在畜禽类组织、毛发、尿液及饲料等方面,对水产品中β-受体激动剂残留研究甚少。检测方法存在同时测定β-受体激动剂种类少,很多禁用β-受体激动剂未纳入检测范畴,以及涉及的样品种类少等问题。因此,为实现对水产品中β-受体激动剂残留全面监管,控制违法滥用β-受体激动剂的行为,急需建立适合多种水产品样品基质及同时测定多种类β-受体激动剂药物残留的检测方法,提高检测效率,为水产品中多种β-受体激动剂残留监管、尤其是禁用β-受体激动剂的监管提供技术支撑。本研究首先以河鳗为对象,选择典型β-受体激动剂沙丁胺醇、莱克多巴胺和妥布特罗,通过室内养殖用药实验,制备了含有沙丁胺醇、莱克多巴胺和妥布特罗三种β-受体激动剂的河鳗阳性样品;利用阳性样品研究了三种β-受体激动剂在河鳗肌肉中存在的形态以及β-受体激动剂由结合态转化为游离态的方法,为β-受体激动剂在水产品中残留量测定方法的研究提供理论基础。其次利用液相色谱-串联质谱技术开展了水产品中多种β-受体激动剂残留同时检测的方法研究,通过仪器分析条件的优化,提取剂的筛选及净化方法的探索,最终建立了水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法。该方法具有操作简单、灵敏度高、检测种类多、适用性强等优点。最后利用建立的β-受体激动剂残留检测方法对流通领域的水产品进行了筛查,考察流通领域水产品的安全性。本项目研究结果如下:（1）采用实验室养殖给药方式制备了含有沙丁胺醇、莱克多巴胺和妥布特罗三种β-受体激动剂的河鳗阳性样品。三种β-受体激动剂在河鳗肌肉中主要以结合态和游离态二种形式存在,沙丁胺醇、莱克多巴胺和妥布特罗在河鳗肌肉中结合态所占的比例分别为79.1%、89.0%和73.9%。（2）利用阳性样品,研究了将结合态β-受体激动剂转化为游离态β-受体激动剂的两种水解方式,包括酶解水解方式的水解温度和水解时间,酶解时酶解剂的p H及添加的酶量,盐酸酸解中盐酸的浓度等,并对不同的水解方法进行了对比,确定了最佳水解方案。最佳的水解方法及最佳水解条件为:37℃下,在0.2 mol/L乙酸铵水溶液中添加50.0μLβ-葡萄糖醛酸甙酶/芳基硫酸酯酶酶解16 h。（3）利用液相色谱-串联质谱技术,建立水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法。最佳仪器分析条件为:利用色谱柱CAPCELL PAK MGⅡC18（2.0mm I.D×100 mm,3μm）在5.0 mmol/L乙酸铵水溶液（含0.2%甲酸）和0.1%甲酸-乙腈流动相下采用分段梯度洗脱将18种化合物完全分离;采用电喷雾离子源正离子扫描模式检测（ESI+）,内标法定量。方法检出限（LOD）为0.250.50μg/kg,定量限（LOQ）为0.250.50μg/kg。18种β-受体激动剂在0.20200.00μg/L范围内线性相关系数>0.991,18种β-受体激动剂在0.50μg/kg20.00μg/kg的添加水平下加标回收率为70.0%115.0%,批内相对标准偏差小于12.9%,批间相对标准偏差小于13.5%。（4）采用已建立的方法对上海、江苏养殖基地和上海、江苏、四川和拉萨流通市场上水产品进行检测,对水产品中β-受体激动剂残留现状进行了评估。检测结果显示:47个样品中3个样品中检测到β-受体激动剂,检出率为6.3%。其中河鳗样品含有莱克多巴胺、沙丁胺醇和妥布特罗3种禁用β-受体激动剂,残留检测量分别为2.10μg/kg、3.00μg/kg和2.90μg/kg;草鱼肌肉中含有莱克多巴胺0.38μg/kg;大黄鱼样品中含有克伦特罗和克仑潘特,残留量分别为1.26μg/kg、0.29μg/kg,因此需要对水产品中β-受体激动剂残留进行安全监测。
周剑,齐鑫,杨梦瑞,王彤彤,王敏[6]（2019）在《甲醇中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇3种溶液标准物质的定值及不确定度评估》文中进行了进一步梳理采用有证标准物质和市售纯品为标准物质原料,经过定性和纯度核验的研究,采用重量-容量法配制了甲醇中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇3种溶液标准物质,经均匀性和稳定性检验合格,并进行了定值、均匀性和稳定性的不确定度评估。甲醇中克伦特罗溶液、甲醇中沙丁胺醇溶液和甲醇中莱克多巴胺溶液,已被批准为国家二级标准物质,标准物质的研制为农产品质量安全相关项目的监测与风险评估提供了溯源保障。
高静纹[7]（2017）在《食品中克伦特罗、喹诺酮类药物新型检测方法建立》文中提出克伦特罗（CLB）属β2-兴奋剂,具有“营养再分配效应”,可提高畜禽产品的瘦肉率,故常被不法分子应用于畜禽养殖过程中。喹诺酮类药物是畜禽和水产养殖中常用的抗菌药。长期食用残留此二类药物的食品会对人体健康带来损害。因此,建立对该二类药物具有特异性好、灵敏度高的检测新型方法对保证我国的食品安全具有重要意义。本文基于分子印迹技术分别建立了 CLB仿生酶联免疫检测方法和喹诺酮类药物多残留上转换荧光探针检测方法,为提高我国食品安全检测水平提供了技术支持。通过CLB和甲基丙烯酰氯反应合成了克伦特罗二取代衍生物,并通过核磁、质谱等方法对CLB衍生物进行了表征。以CLB衍生物为复合功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,通过紫外引发聚合直接在96孔酶标板孔中制备了对CLB具有选择性识别能力的分子印迹聚合物仿生抗体,优化了聚合条件,并对聚合物的选择性和再生性能进行了考察。结果显示,制备的MIPs仿生抗体对于CLB具有较好的选择性和吸附性能,以该分子印迹为仿生抗体建立的仿生免疫检测方法的线性范围为10-5～103 μg/L,最低检测限为10-7 μg/L,实际样品猪肉和饮用水中CLB添加回收实验的平均回收率分别为86.02～103.00%和80.7～110.0%。该方法操作简单、快速、灵敏度高,能满足对痕量CLB检测的需求。将具有特异选择性的分子印迹聚合物与上转换荧光材料、Fe304磁性纳米粒子相结合,以恩诺沙星为模板分子,以甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,二苯甲酮为引发剂,采用表面印迹法成功制备了喹诺酮类分子印迹聚合物荧光探针。利用SEM、XRD、能谱分析、红外光谱等方法对制备的荧光探针进行了表征。吸附实验结果表明,合成的分子印迹荧光探针具有较高的吸附容量,较好的选择性,较快的传质速率（浓度为60μg/L时,15 min可达到吸附平衡）以及稳定的光化学特性（荧光达到稳定后至少可维持1h）。该荧光探针对5种喹诺酮类药物具有显着的荧光猝灭效应,并在最优条件下建立了对该5种喹诺酮类药物的标准曲线。在对实际样品大菱鲆进行添加回收实验中,该方法的平均回收率为90.33～108.43%,相对标准偏差（RSD）小于5.53%。该方法简单、快速、检测费用低,适用于鱼类等样品中喹诺酮类药物多残留检测分析。
胡红芹,张坤[8]（2017）在《饲料中药物残留及其检测方法研究进展》文中研究说明随着畜牧业的快速发展,饲料作为畜牧业发展的后盾,不但投入加大而且更加多样化和全面化,为集约化养殖业提供了坚实的技术保障,同时饲料的安全问题也备受人们关注,饲料安全直接影响着畜产品的安全,与人类的健康密切相关。而在饲料生产过程中,一些企业违反我国有关法律法规,滥用药物或不规范使用药物,造成畜产品中残留超标,进而危害人们身体健康。目前,我国和欧盟及其他国家对动物源性食品中兽药残留的检测加大了力度,而饲料中违规添加的药物也是动物源性食品中兽药残留的主要因素,因此饲料中药物的检测也不容忽视。
郑建武[9]（2017）在《克伦特罗及其代谢物替代模板分子印迹聚合膜的研制》文中提出克伦特罗,瘦肉精的主要成分,常被非法添加到动物饲料中,以提高猪肉瘦肉率。常规的检测方法成本高、耗时长。因此,如何快速、准确、实时检测克伦特罗及其代谢物是国内外研究的热点。根据相关文献报道,确定克伦特罗在猪尿液中的主要代谢物,选择了主要代谢物中3,5-二氯-对氨基扁桃酸、原药克伦特罗（CLB）和3,5-二氯-对氨基马尿酸为研究对象。分别选择4-羟基扁桃酸（HMA）去氧肾上腺素（PE）、和对氨基马尿酸（AHA）为3,5-二氯-对氨基扁桃酸克伦特罗、及3,5-二氯-对氨基马尿酸替代模板分子。第一部分,利用高效液相色谱法将CLB、HMA和AHA三种物质进行分离,确定最佳分离条件:Inertsil ODS-3 C18色谱柱（4.6 mm ID×250mm,5?m）,流动相为A液（0.05%三氟乙酸水溶液）:B液（0.05%三氟乙酸乙腈溶液）=73:27。同时,绘制了CLB、AHA和HMA的浓度与信号峰面积的标准曲线,三种物质的标准曲线线性关系良好,其中CLB标准曲线为y=17315.6734 x+112602.8427,R2=0.9995;AHA的标准曲线为y=13744.7429 x-89583.6575,R2=0.9998;HMA的标准曲线y=6386.5714 x-1762.0928,R2=0.9992。第二部分,研究了接枝在硅胶表面的替代模板分子印迹聚合膜的选择吸附性能。首先制备了APCA-硅胶,并在其表面合成替代模板分子印迹膜,并探讨优化了在硅胶表面合成PE-MIPs、AHA-MIPs和HMA-MIPs印迹膜的最佳反应条件:温度65℃,时间12h。最佳反应条件下制备的PE-MIPs对CLB吸附率为92.34%,AHA-MIPs对AHA的吸附率为88.68%,HMA-MIPs对HMA的吸附率为91.84%。同时,纯硅胶对CLB、AHA和HMA的吸附率分别为18.36%、33.65%和22.41%;最佳反应条件下未加替代模板分子的聚合膜对CLB、AHA和HMA的吸附率56.99%、51.19%和51.21%。最后一部分,研究了接枝在石英晶体微天平表面替代模板分子印迹聚合膜的形态。在石英晶体微天平上接枝制备出ABAH-QCM,显微红外表征分析结果表明接枝成功。在ABAH-QCM合成了克伦特罗替代模板分子印迹聚合膜,圆二色谱分析表明替代模板分子印迹聚合膜具有类似于蛋白质二级结构,生物快速扫描探针显微镜观察替代模板分子印迹聚合膜为空穴的三维网状结构形态。本研究可为后续开发基于分子印迹膜结合石英晶体微天平阵列技术的快速、实时、便捷检测猪尿液克伦特罗及其代谢物的电子舌提供技术支持和理论依据。同时,由于分子印迹技术普通适用性,也为食品安全领域如毒物的富集、检测等提供参考。
罗海峰[10]（2016）在《新型快速诊断方法对牛疫病和饲料安全应用的研究》文中研究指明现代畜牧业的发展面临许多挑战,其核心内容便是畜牧业的安全体系的建立,包括生物安全体系、畜产品质量安全体系以及环境安全体系。在生物安全体系中疫病的防控是其核心,而满足疫病防控所需求的检测试剂是多方面工作的基础条件,可以帮助了解疫病流行情况、监控疫病爆发趋势、评估免疫质量,甚至为疫病净化提供决策性信息。而对于畜产品质量安全体系而言,确保饲料安全,控制兽药滥用是保证食品安全的源头,因此对满足畜产品生产各个环节的检测试剂开展研究具有重大意义。同时疫病防控与畜产品质量安全体系完善后自然也促进了环境安全体系的完善。牛支原体感染是目前包括中国在内的世界各国广泛流行的一种病原微生物性疾病,其感染牛群后会造成一系列严重后果,导致牛的乳房炎、关节炎、肺炎、结膜炎以及母牛流产等,最终影响畜牧业的生产效率。牛病毒性腹泻病毒（BVDV）是牲畜中一种重要的病原体,其属于瘟病毒属黄病毒科目,BVDV感染会造成动物免疫系统抑制,从而导致牲畜易于受到其他病原体的侵害,并且由于持续感染牛的存在,BVDV会持续影响牛的生长或者产奶,给畜牧业造成重大损失。克伦特罗俗称“瘦肉精”,是畜牧业中的违禁药物,其可以促进动物肌肉的生长,但是同时经过畜产品会传递给人类,造成急性中毒或者慢性中毒。黄曲霉毒素B1是目前最致癌的物质,污染的饲料中的黄曲霉会产生该毒素,经由动物吸收后会最终影响人类健康。本研究关注诊断学在畜牧业安全体系中的应用,因此选择了病原体抗体检测、抗原检测、非法药物及饲料毒素残留四个方面,运用侧向层析技术、胶体金技术以及上转换发光技术进行系列快速检测试剂的开发。其中上转换发光技术运用稀土元素的上转换发光性质,开发成相应的上转换纳米材料,运用于免疫检测中,用于开发快速定量检测试剂,为创新性检测方法。最终本研究建立了上转换发光法检测技术平台和胶体金检测技术平台,开发了牛支原体抗体快速检测试剂（P48-CG）、BVDV快速检测试剂（BVDV-CG）以及克伦特罗上转发光快速检测试剂（CL-UPT）和黄曲霉毒素B1快速检测试剂（AFB1-UPT）。其中P48-CG与ELISA检测试剂相符率达到93%以上,灵敏度与ELISA试剂一致,可以有效检测牛支原体抗体。BVDV-CG检测619份血清血浆样本,灵敏度特异性分别为98.4%和99.4%;检测858份全血样本,灵敏度特异性分别为96.5%和99.1%;检测440份耳组织样本,灵敏度特异性均达到100%。CL-UPT检测灵敏度达到0.05ppb,与LC-MS/MS相比定量结果偏差在15%以内。AFB1-UPT检测灵敏度达到0.39ppb,与HPLC相比定量结果偏差在15%以内。针对动物疫病和饲料安全的系列检测试剂的开发将有助于完善畜牧业安全体系。
二、动物饲料中克伦特罗的气质色谱法测定研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、动物饲料中克伦特罗的气质色谱法测定研究（论文提纲范文）
（1）表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写词表(Abbreviations) |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 β_2受体激动剂的简介 |
| 1.1.1 β_2受体激动剂的理化性质 |
| 1.1.2 β_2受体激动剂的药学作用和毒副作用 |
| 1.1.2.1 药学作用 |
| 1.1.2.2 毒副作用 |
| 1.1.3 国内外监控现状 |
| 1.1.4 检测方法研究 |
| 1.2 表面等离子体生物传感器 |
| 1.2.1 SPR生物传感器的基本原理 |
| 1.2.2 SPR生物传感器的分类及特点 |
| 1.2.3 SPR生物传感器在β_2-受体激动剂中的研究进展 |
| 1.3 研究内容及意义 |
| 第二章 克伦特罗和沙丁胺醇单克隆抗体的制备 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 主要仪器 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要溶液配制 |
| 2.1.4 实验所用动物和细胞 |
| 2.2 克伦特罗单克隆抗体的制备 |
| 2.2.1 动物免疫 |
| 2.2.2 细胞融合 |
| 2.2.3 阳性孔的筛选与克隆 |
| 2.2.4 腹水制备 |
| 2.2.5 单克隆抗体性质的鉴定 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 包被抗原的工作浓度及阳性血清效价 |
| 2.3.2 杂交瘤细胞的筛选和稳定性 |
| 2.3.3 单抗亚类鉴定 |
| 2.3.4 单抗性质鉴定 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 SPR检测克伦特罗 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 药品与试剂 |
| 3.1.2 仪器与设备 |
| 3.1.3 相关溶液的配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 克伦特罗抗体的固定 |
| 3.2.2 再生条件的选择 |
| 3.2.3 抗原-抗体动力学实验 |
| 3.2.4 建立标准曲线 |
| 3.2.5 特异性 |
| 3.2.6 稳定性和重复性 |
| 3.2.7 准确度和精密度 |
| 3.2.8 SPR传感器和UPLC-MS/MS的比较 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 克伦特罗抗体的固定 |
| 3.3.2 再生条件的确定 |
| 3.3.3 抗原-抗体动力学分析 |
| 3.3.4 标准曲线的构建 |
| 3.3.5 特异性 |
| 3.3.6 稳定性和重复性 |
| 3.3.7 准确度和精密度 |
| 3.3.8 SPR生物传感器和UPLC-MS/MS比较 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 SPR检测沙丁胺醇 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 药品与试剂 |
| 4.1.2 仪器与设备 |
| 4.1.3 相关溶液配制 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 抗体的固定 |
| 4.2.2 再生条件的确定 |
| 4.2.3 抗原-抗体动力学分析 |
| 4.2.4 标准曲线的构建 |
| 4.2.5 特异性分析 |
| 4.2.6 稳定性和重复性 |
| 4.2.7 准确度和精密度 |
| 4.2.8 SPR生物传感器和UPLC-MS/MS比较 |
| 4.4 小结 |
| 结论 |
| 1 制备了抗克伦特罗和抗沙丁胺醇单克隆抗体 |
| 2 建立了检测牛尿中的克伦特罗和沙丁胺醇的SPR直接检测法 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
（2）农产品中β2-激动剂检测技术研究进展（论文提纲范文）
| 1 仪器分析技术 |
| 1.1 高效液相色谱法 |
| 1.2 液相色谱串联质谱法 |
| 1.3 气相色谱串联质谱法 |
| 1.4 液相色谱-高分辨质谱法 |
| 1.5 内部萃取电喷雾电离质谱法 |
| 2 免疫分析技术 |
| 2.1 酶联免疫法 |
| 2.1.1基于抗体的酶联免疫法 |
| 2.1.2基于β2-AR受体的酶联免疫法 |
| 2.2 免疫层析试纸条法 |
| 3 传感器法 |
| 3.1 化学传感器 |
| 3.2 生物传感器 |
| 4 标志物法 |
| 4.1 转录水平标志物 |
| 4.2 蛋白水平标志物 |
| 4.3 代谢水平标志物 |
| 5 结论与展望 |
（3）牛奶中β-受体激动剂和β-阻断剂类药物多残留检测方法的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略表 |
| 文献综述 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 仪器 |
| 2.1.2 试剂与药品 |
| 2.1.3 样品 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 质谱分析方法 |
| 2.2.2 液相色谱分析方法 |
| 2.2.3 牛奶样品的前处理方法 |
| 2.2.4 UPLC-MS/MS检测方法的评价 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 质谱条件的建立 |
| 3.2 液相色谱条件的建立 |
| 3.3 样品前处理 |
| 3.3.1 提取液的选择 |
| 3.3.2 酶解条件的优化 |
| 3.3.3 MCX柱净化条件建立 |
| 3.4 牛奶中β-受体激动剂和β-受体阻断剂类药物残留的UPLC-MS/MS检测方法的评价 |
| 3.4.1 基质效应 |
| 3.4.2 线性关系、检出限和定量限 |
| 3.4.3 准确度与精密度 |
| 3.4.4 稳定性测定 |
| 4 讨论 |
| 4.1 质谱条件的建立 |
| 4.2 液相色谱条件的建立 |
| 4.3 样品前处理方法的建立 |
| 4.3.1 酶解条件的建立 |
| 4.3.2 提取条件的建立 |
| 4.4 净化条件的选择 |
| 4.5 基质效应的消除 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录A |
| 作者简介 |
（4）巯烯加成制备液相色谱固定相及其在手性对映体分析中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 手性及手性分离 |
| 1.1.1 手性的提出及研究意义 |
| 1.1.2 手性对映体分离的方法 |
| 1.2 超分子主体化学与手性分离 |
| 1.2.1 环糊精类固定相 |
| 1.2.2 大环抗生素类固定相 |
| 1.2.3 多糖类纤维素固定相 |
| 1.3 固定相基质的选择 |
| 1.4 点击化学反应 |
| 1.5 研究的目的意义、主要内容和创新性 |
| 1.5.1 研究的目的意义 |
| 1.5.2 研究的主要内容 |
| 1.5.3 本研究的主要创新性 |
| 第2章 制备苄基脲-β-环糊精键合相用于建立LC-MS/MS监测人尿中巯基尿酸手性标志物新方法 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 仪器与试剂 |
| 2.2.2 苄基脲乙二胺单衍生化-β-环糊精键合相的制备 |
| 2.2.2.1 苄基脲单衍生化-β-环糊精手性柱的制备 |
| 2.2.2.2 巯丙基硅胶的制备 |
| 2.2.2.3 苄基脲-β-环糊精键合相(BzCDP)的制备 |
| 2.2.3 仪器分析 |
| 2.2.4 标准溶液配制 |
| 2.2.5 样品提取与净化 |
| 2.2.6 方法验证 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 苄基脲-β-环糊精固定相的制备方法和结构表征 |
| 2.3.2 PMA和BMA手性分析条件的选择 |
| 2.3.2.1 有机相含量对手性分离的影响 |
| 2.3.2.2 流动相pH值对手性分离的影响 |
| 2.3.2.3 柱温对手性拆分的影响 |
| 2.3.3 优化色谱条件 |
| 2.3.4 质谱分析条件的选择 |
| 2.3.5 优化样品前处理 |
| 2.3.6 方法确认 |
| 2.3.6.1 线性回归和最低检出限 |
| 2.3.6.2 准确度、精密度和稳定性测试 |
| 2.3.6.3 BzCDP制备方法的重现性 |
| 2.3.6.4 基质效应 |
| 2.3.7 实际尿样分析 |
| 2.4 结论 |
| 第3章 苄基苯乙醇胺-β-环糊精键合相的制备及其“多模式”手性色谱性能研究与应用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 仪器与试剂 |
| 3.2.2 S(-)-苄基苯乙醇胺-β-环糊精键合固定相(BzCSP)的合成 |
| 3.2.3 Fe_3O_4磁性纳米粒子的制备 |
| 3.2.4 结构表征 |
| 3.2.5 仪器分析 |
| 3.2.5.1 液相色谱对手性分子的分离评价 |
| 3.2.5.2 液相色谱和质谱联用定量分析条件 |
| 3.2.6 果蔬样品前处理方法 |
| 3.2.7 方法验证和CSP分离能力的评价 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 固定相的表征 |
| 3.3.2 不同类型对映体在多模式下的分离评价 |
| 3.3.3 对实际样品中的手性对映体手性分离应用 |
| 3.3.3.1 标准曲线与检出限 |
| 3.3.3.2 准确度、精密度与稳定性测试 |
| 3.3.3.3 实际样品分析 |
| 3.4 结论 |
| 第4章 制备替考拉宁键合相用于建立LC-MS/MS测定肉中克伦特罗和沙丁胺醇对映体新方法 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 仪器与试剂 |
| 4.2.2 替考拉宁大环抗生素手性固定相的合成 |
| 4.2.3 仪器参数 |
| 4.2.4 标准溶液与工作溶液的配制 |
| 4.2.5 样品的提取和净化 |
| 4.2.6 方法验证 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 替考拉宁的巯烯加成键合方法 |
| 4.3.2 固定相的表征 |
| 4.3.3 键合量对手性分离的影响 |
| 4.3.4 克伦特罗和沙丁胺醇手性分析条件的选择 |
| 4.3.4.1 手性分离模式的选择 |
| 4.3.4.2 甲酸铵用量对手性分离的影响 |
| 4.3.4.3 有机溶剂对手性分离的影响 |
| 4.3.4.4 乙酸用量对手性分离的影响 |
| 4.3.4.5 柱温对手性拆分的影响 |
| 4.3.5 质谱分析条件的选择 |
| 4.3.6 优化样品制备 |
| 4.3.7 方法确认 |
| 4.3.7.1 线性回归和最低检测限 |
| 4.3.7.2 基质效应 |
| 4.3.7.3 准确度、精密度和稳定性测试 |
| 4.3.8 方法应用 |
| 4.4 结论 |
| 第5章 制备3,5-二氯苯基氨基甲酸酯化纤维素键合相用于建立LC-MS/MS测定手性杀菌剂对映体新方法 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 仪器与试剂 |
| 5.2.2 3,5-二氯苯基氨基甲酸酯化纤维素键合手性固定相(CELCSPs)的合成 |
| 5.2.3 表征 |
| 5.2.4 色谱和质谱条件 |
| 5.2.5 样品提取和净化 |
| 5.2.6 分析方法的确认和CSP分离能力的评价 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 纤维素的衍生化和巯-烯加成键合反应 |
| 5.3.2 配体与固定相的基本结构表征 |
| 5.3.2.1 配体DCLCEL的1HNMR谱分析 |
| 5.3.2.2 配体DCLCEL的红外光谱分析 |
| 5.3.3 CELCSP对农药手性分离的评价 |
| 5.3.3.1 流动相的组成对手性分离度的影响 |
| 5.3.3.2 键合量对手性分离的影响 |
| 5.3.3.3 手性农药结构对分离的影响 |
| 5.3.3.4 柱温和热力学参数对手性分离的影响 |
| 5.3.3.5 流速和进样量对手性分离的影响 |
| 5.3.3.6 MRM优化质谱检测条件 |
| 5.3.4 样品前处理 |
| 5.3.5 方法确认 |
| 5.3.5.1 配制标准溶液 |
| 5.3.5.2 回收率测试 |
| 5.3.5.3 方法重现性测试 |
| 5.3.6 实际样品分析 |
| 5.4 结论 |
| 第6章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 缩写 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
（5）水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1.1 β-受体激动剂结构分类 |
| 1.2 β-受体激动剂的应用及危害 |
| 1.3 β-受体激动剂在动物组织中的残留限量及相关法律法规 |
| 1.4 β-受体激动剂在动物组织中的代谢规律 |
| 1.4.1 β-受体激动剂在动物体内的主要代谢反应 |
| 1.4.2 β-受体激动剂在动物体内的主要代谢规律 |
| 1.5 β-受体激动剂残留检测技术概述 |
| 1.5.1 免疫分析方法 |
| 1.5.1.1 胶体金免疫层析法 |
| 1.5.1.2 酶联免疫法 |
| 1.5.2 仪器分析法 |
| 1.5.2.1 气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS) |
| 1.5.2.2 液相/超高效液相色谱-串联质谱法(LC/UPLC-MS) |
| 1.5.2.3 毛细管电泳法(CE) |
| 1.5.3 其它检测方法 |
| 1.6 选题的目的意义及研究内容 |
| 第二章 典型β-受体激动剂阳性样品的制备及其水解条件的研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 仪器设备与实验材料 |
| 2.2.1 仪器设备 |
| 2.2.2 标准品及其配制 |
| 2.2.3 试剂及其配制 |
| 2.2.4 实验材料 |
| 2.3 仪器分析条件 |
| 2.3.1 色谱条件 |
| 2.3.2 质谱条件 |
| 2.4 实验方案 |
| 2.4.1 河鳗阳性样本的制备 |
| 2.4.1.1 实验对象与养殖条件 |
| 2.4.1.2 预实验方案 |
| 2.4.1.3 正式实验方案 |
| 2.4.2 河鳗肌肉中典型β-受体激动剂的结合态和游离态的含量测定 |
| 2.4.2.1 河鳗肌肉中典型β-受体激动剂的提取与含量测定 |
| 2.4.2.2 β-受体激动剂基质匹配标准工作液的配制 |
| 2.4.3 酶解和酸解条件的优化 |
| 2.4.3.1 酶解条件的优化 |
| 2.4.3.2 酸解条件的优化 |
| 2.4.3.3 样品前处理方法 |
| 2.5 实验结果与讨论 |
| 2.5.1 河鳗肌肉中典型β-受体激动剂的含量 |
| 2.5.1.1 预实验结果 |
| 2.5.1.2 正式实验结果 |
| 2.5.2 河鳗肌肉中典型β-受体激动剂存在形态的含量 |
| 2.5.3 酶解水解条件的优化结果 |
| 2.5.3.1 酶解溶液pH对水解效率的影响 |
| 2.5.3.2 酶用量对水解效率的影响 |
| 2.5.3.3 酶解温度和酶解的时间对水解效率的影响 |
| 2.5.4 酸解条件的研究 |
| 2.5.4.1 盐酸浓度对水解效率的影响 |
| 2.5.4.2 盐酸水解温度和时间对水解效率的影响 |
| 2.5.5 酶解和酸解条件分析 |
| 2.6 本章小结 |
| 第三章 水产品中18种β-受体激动剂多残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法的建立 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 仪器设备与实验材料 |
| 3.2.1 仪器设备 |
| 3.2.2 标准品与试剂 |
| 3.2.2.1 标准品 |
| 3.2.2.2 试剂 |
| 3.2.2.3 标准溶液的配制 |
| 3.2.3 实验材料 |
| 3.3 实验方案 |
| 3.3.1 18种β-受体激动剂的超高压液相色谱-串联质谱仪器分析条件的建立. |
| 3.3.1.1 质谱仪器分析条件的优化 |
| 3.3.1.2 超高压液相色谱仪器分析条件的优化 |
| 3.3.2 水产品中18种β-受体激动剂的提取方法的研究 |
| 3.3.2.1 提取与净化方法 |
| 3.3.2.2 复溶液及针式滤膜的选择 |
| 3.3.2.3 定量方法 |
| 3.3.2.4 方法有效性评价 |
| 3.4 结果分析与讨论 |
| 3.4.1 18种β-受体激动剂的超高效液相色谱-串联质谱仪器分析条件 |
| 3.4.1.1 质谱分析条件 |
| 3.4.1.2 液相色谱分析条件 |
| 3.4.1.3 最佳仪器分析条件 |
| 3.4.2 建立水产品中18种β-受体激动剂的提取方法 |
| 3.4.2.1 水解方式的选择 |
| 3.4.2.2 净化方式的研究 |
| 3.4.2.3 固相萃取柱的选择 |
| 3.4.2.4 复溶溶液的优化 |
| 3.4.2.5 针式滤膜的选择 |
| 3.4.2.6 最佳样品前处理方法 |
| 3.4.3 定量方法的研究 |
| 3.4.3.1 基质效应的研究 |
| 3.4.3.2 同位素内标物的确定 |
| 3.4.4 方法有效性评价 |
| 3.4.4.1 方法线性范围及检测限、定量限 |
| 3.4.4.2 方法回收率与精密度 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 水产品中β-受体激动剂残留筛查 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 仪器设备与实验材料 |
| 4.2.1 仪器设备 |
| 4.2.2 试剂与材料 |
| 4.2.3 样品来源 |
| 4.2.4 水产品中18种β-受体激动剂的检测 |
| 4.3 结果分析与讨论 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的论文目录 |
（6）甲醇中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇3种溶液标准物质的定值及不确定度评估（论文提纲范文）
| 1 实验部分 |
| 1.1 主要仪器与试剂 |
| 1.2 原料定性分析 |
| 1.3 原料定值分析 |
| 1.3.1 液相色谱-面积归一化法 (HPLC-AN) |
| 1.3.2 示差扫描量热法 (DSC) |
| 1.4 溶液标准物质制备 |
| 1.5 均匀性和稳定性检验 |
| 1.5.1 均匀性检验 |
| 1.5.2 稳定性检验 |
| 2 结果与讨论 |
| 2.1 原料的定性分析 |
| 2.2 原料的纯度核验 |
| 2.3 均匀性检验结果分析 |
| 2.4 稳定性考察结果分析 |
| 2.5 不确定评估 |
| 2.5.1 不均匀引入的不确定度 |
| 2.5.2 不稳定引入的不确定度 |
| 2.5.3 溶液配制引入的不确定度 |
| 3 结论 |
（7）食品中克伦特罗、喹诺酮类药物新型检测方法建立（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 克伦特罗简介 |
| 1.1.1 克伦特罗作用 |
| 1.1.2 克伦特罗检测方法 |
| 1.2 喹诺酮类药物简介 |
| 1.2.1 喹诺酮类药物作用 |
| 1.2.2 喹诺酮类药物检测方法 |
| 1.3 磁性荧光多功能材料 |
| 1.3.1 磁性荧光材料 |
| 1.3.2 上转换发光材料 |
| 1.3.3 磁性稀土上转换荧光材料制备方法 |
| 1.4 分子印迹技术 |
| 1.4.1 分子印迹技术的基本原理 |
| 1.4.2 分子印迹聚合物的合成方法 |
| 1.5 分子印迹免疫吸附检测技术 |
| 1.6 本课题研究意义 |
| 1.6.1 克伦特罗仿生免疫检测方法的建立 |
| 1.6.2 基于分子印迹上转换荧光探针对水产品中喹诺酮类药物残留检测方法的建立 |
| 第二章 克伦特罗仿生免疫检测方法的建立 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 主要药品和试剂 |
| 2.2.2 主要仪器设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 克伦特罗衍生物的合成 |
| 2.3.2 克伦特罗分子印迹仿生抗体合成 |
| 2.3.3 CLB酶标记物制备和表征 |
| 2.3.4 直接竞争仿生酶联免疫吸附测定(BELISA)方法 |
| 2.3.5 形态表征 |
| 2.3.6 吸附动力学实验 |
| 2.3.7 选择性吸附实验 |
| 2.3.8 标准曲线的建立 |
| 2.3.9 有机溶剂对吸附性能的影响 |
| 2.3.10 实际样品准备 |
| 2.3.11 HPLC仪器法确证 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 聚合条件中交联剂用量的优化 |
| 2.4.2 聚合条件中紫外引发时间的优化 |
| 2.4.3 扫描电镜分析 |
| 2.4.4 吸附平衡时间 |
| 2.4.5 BELISA标准曲线的建立 |
| 2.4.6 有机溶剂对BELISA的影响 |
| 2.4.7 BELISA方法特异性 |
| 2.4.8 实际样品检测 |
| 2.4.9 BELISA方法稳定性 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 基于分子印迹上转换荧光探针对水产品中喹诺酮类药物残留检测方法的建立 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 主要药品和试剂 |
| 3.2.2 主要仪器设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 磁性荧光材料的合成 |
| 3.3.2 磁性分子印迹荧光探针MIP@MUCPs的制备及制备条件优化 |
| 3.3.3 吸附动力学 |
| 3.3.4 等温吸附实验 |
| 3.3.5 荧光猝灭平衡时间 |
| 3.3.6 MIP@MUCPs荧光强度与喹诺酮类药物浓度的关系 |
| 3.3.7 选择性吸附实验 |
| 3.3.8 荧光分析 |
| 3.3.9 实际样品制备 |
| 3.3.10 液相验证 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 模板分子、功能单体与交联剂用量比例的优化 |
| 3.4.2 聚合时间优化 |
| 3.4.3 SEM表征 |
| 3.4.4 EDX表征 |
| 3.4.5 红外光谱表征 |
| 3.4.6 XRD衍射图谱表征 |
| 3.4.7 磁性能表征 |
| 3.4.8 吸附动力学 |
| 3.4.9 等温吸附实验 |
| 3.4.10 荧光探针猝灭平衡时间 |
| 3.4.11 选择性实验 |
| 3.4.12 磁性分子印迹荧光探针(MIP@MUCPs)与五种喹诺酮类药物浓度的关系及荧光猝灭方程 |
| 3.4.13 实际样品检测及液相验证 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 结论与展望 |
| 4.1 结论 |
| 4.1.1 克伦特罗仿生免疫检测方法的建立 |
| 4.1.2 喹诺酮类药物分子印迹上转换纳米荧光探针检测方法的建立 |
| 4.2 创新点 |
| 4.3 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间论文发表情况 |
| 致谢 |
（8）饲料中药物残留及其检测方法研究进展（论文提纲范文）
| 1 药物在饲料中的残留及其危害 |
| 1.1 药物在饲料中的残留 |
| 1.2 药物残留危害 |
| 1.2.1“三致(致癌、致畸、致突变)”作用 |
| 1.2.2 过敏反应和慢性毒性作用 |
| 1.2.3 影响生态环境和畜牧业发展 |
| 2 饲料中药物残留检测方法研究进展 |
| 2.1 分光光度法 |
| 2.2 气相色谱-质谱法(GC/MS) |
| 2.3 高效液相色谱法(HPLC) |
| 2.4 免疫分析技术 |
| 3 结语 |
（9）克伦特罗及其代谢物替代模板分子印迹聚合膜的研制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 克伦特罗简述 |
| 1.1.1 盐酸克伦特罗性质及危害 |
| 1.1.2 克伦特罗传统检测方法 |
| 1.1.3 克伦特罗特主要代谢物 |
| 1.2 分子印迹技术 |
| 1.2.1 分子印迹技术发展简介 |
| 1.2.2 分子印迹技术基本原理 |
| 1.2.3 分子印迹技术的特点及应用 |
| 1.3 石英晶体微天平传感器的简述 |
| 1.3.1 石英晶体微天平简述 |
| 1.3.2 石英晶体原理应用 |
| 1.3.3 石英晶体微天平阵列传感器 |
| 1.4 研究内容和目的 |
| 第二章 高效液相色谱法分离CLB、AHA和HMA |
| 2.1 引言 |
| 2.2 试剂与仪器 |
| 2.2.1 主要试剂 |
| 2.2.2 主要仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 流动相的准备 |
| 2.3.2 标样溶液的配制 |
| 2.3.3 高效液相色谱仪的准备工作 |
| 2.3.4 高效液相色谱分离条件的筛选 |
| 2.3.5 标准曲线的绘制 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 高效液相色谱分离条件 |
| 2.4.2 CLB、AHA和HMA的标准曲线 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 基于分子印迹膜硅胶（MIPS-SI）制备及性能测定 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 试剂与仪器 |
| 3.2.1 主要试剂 |
| 3.2.2 主要仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 ACPA-硅胶的制备 |
| 3.3.2 硅胶的表征 |
| 3.3.3 分子印迹聚合物反应条件的优化 |
| 3.3.4 分子印迹聚合物吸附性能测定 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 结果表征 |
| 3.4.2 分子印迹聚合物合成最佳条件的确定 |
| 3.4.3 分子印迹聚合膜选择吸附性 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 基于分子印迹聚合膜石英晶体微天（MIPS-QCM）平制备与表征 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 试剂与仪器 |
| 4.2.1 主要试剂 |
| 4.2.2 主要仪器设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 石英晶体微天平金电极表面清洗 |
| 4.3.2 11-MUA-QCM的自组装 |
| 4.3.3 ABAH-QCM的制备 |
| 4.3.4 MIPs-QCM的合成 |
| 4.4 结果表征 |
| 4.4.1 ABAH-QCM显微红外表征 |
| 4.4.2 MIPs-QCM圆二色谱表征 |
| 4.4.3 MIPs-QCM生物快速扫描探针显微镜表征 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 全文总结 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 研究展望 |
| 参考文献 |
| 附录 1 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 |
（10）新型快速诊断方法对牛疫病和饲料安全应用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 现代畜牧业的发展目标及畜牧业安全体系 |
| 1.2 运用于诊断学的上转换发光技术 |
| 1.3 本研究关注的领域、目标和创新点 |
| 第二章 牛支原体重组膜蛋白表达及检测方法的构建 |
| 2.1 牛支原体研究综述 |
| 2.2 牛支原体重组膜蛋白表达及检测方法建立的材料与方法 |
| 2.3 牛支原体重组膜蛋白表达及检测方法建立的结果与分析 |
| 2.4 牛支原体抗体检测结果的讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 牛病毒性腹泻病毒抗原快速检测方法的研究 |
| 3.1 牛病毒性腹泻病毒研究进展 |
| 3.2 牛病毒性腹泻病毒快速检测方法构建所用材料与方法 |
| 3.3 牛病毒性腹泻病毒快速检测方法构建结果及性能分析 |
| 3.4 牛病毒性腹泻病毒抗原快速检测方法和快速检测方法应用的讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 克伦特罗快速定量上转换发光检测方法的研究 |
| 4.1 克伦特罗研究综述 |
| 4.2 克伦特罗快速定量上转换发光检测方法构建的材料与方法 |
| 4.3 克伦特罗快速定量上转换发光检测方法的结果与分析 |
| 4.4 克伦特罗快速定量上转换发光检测方法的讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 黄曲霉毒素B_1快速定量上转换发光检测方法的研究 |
| 5.1 黄曲霉毒素B_1综述 |
| 5.2 黄曲霉毒素B_1上转换发光检测方法的材料和方法 |
| 5.3 黄曲霉毒素B_1上转换发光检测方法的构建及性能分析 |
| 5.4 黄曲霉毒素B_1上转换发光检测方法及快速定量检测方法应用的讨论 |
| 5.5 小结 |
| 结论 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
四、动物饲料中克伦特罗的气质色谱法测定研究（论文参考文献）
- [1]表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇[D]. 孙铭雪. 烟台大学, 2021(11)
- [2]农产品中β2-激动剂检测技术研究进展[J]. 赵璐瑶,杨曙明,王济世,薛佳俐,刘瑞,刘倩,刘晓夏,王彦云,赵汝婷. 分析试验室, 2020(06)
- [3]牛奶中β-受体激动剂和β-阻断剂类药物多残留检测方法的研究[D]. 王瑞. 安徽农业大学, 2020(04)
- [4]巯烯加成制备液相色谱固定相及其在手性对映体分析中的应用研究[D]. 李良. 南昌大学, 2019
- [5]水产品中18种β-受体激动剂残留检测方法的研究[D]. 陈清平. 上海海洋大学, 2019(02)
- [6]甲醇中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇3种溶液标准物质的定值及不确定度评估[J]. 周剑,齐鑫,杨梦瑞,王彤彤,王敏. 化学试剂, 2019(05)
- [7]食品中克伦特罗、喹诺酮类药物新型检测方法建立[D]. 高静纹. 渤海大学, 2017
- [8]饲料中药物残留及其检测方法研究进展[J]. 胡红芹,张坤. 农产品加工, 2017(04)
- [9]克伦特罗及其代谢物替代模板分子印迹聚合膜的研制[D]. 郑建武. 上海交通大学, 2017(02)
- [10]新型快速诊断方法对牛疫病和饲料安全应用的研究[D]. 罗海峰. 宁夏大学, 2016(02)