问:分子生物学在医学领域的应用
- 答:一些进展使得一些生物技术工具极大提高了生物发光和化学发光的检测和快速应用。这些发展方便了体外和体内持续检测生物过程(如基因表达,蛋白质-蛋白质相互间作用和疾病的进程),可应用于临床、诊断、和药物开发等。而且,结合发光酶或某些在基因水平有生物特异结合位点的发光蛋白发展了超敏感和选择性的生物分析工具,如重组细胞,免疫分析和核酸杂交系统。发光分析信号的高度可侦测性使得它非常适合于微小化的生物分析装置(如微矩阵,微流设备和高密度的微孔板)以用于小量样品体积的基因和蛋白的。
自从20多年前,Marlene DeLuca’s第一个成功的获得表达荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来,生物发光的基历虚应用进入了一个新时代。生物发光和化学发光(BL/CL)的主要特点就在于发光信号的高度可测性,可以用PMT()和CCD成像系统来检测极少量的光子信号。BL是属于CL范畴之内,CL反应的特点是高光子产生效率,BL为05-0.8 ,CL为0.1-0.001。因此BL/CL的检测极限可以达到10-18到10-21摩尔,这显然要比其它的光学技术强的多。
BL/CL已经发展出了很多具体的分析方法来诊断目前微摩尔或纳摩尔级的生物样本。通过BL/CL结合酶反应,如氧化酶、脱氢酶和激酶等,就可以达到如此的检测灵敏度。然而,以发光技术为基础的分析主要还仅仅停留在作为一个诊断工具。如果BL/CL的潜能能够得到开发,那么许多稀有的微量样品也可以通过一个便宜、可靠甚至是点对点的方式进行测量。
分子生物学和生物技术持续地进展产生了一些新的BL/CL试剂,包括重组和突变酶及相关基因,可以作为报告剂或探烂咐针。这些工具的获得,再加上新的CL高效底物,促进了革新性的生物分析技术的出搏燃现,用于许多靶标的超敏感检测。 - 答:这个应用的方面,其实是有很多种的,那可以在临床方面开展起来也是没有问题的。
- 答:奔走生活,学在医学领域的应用是很广泛的,很有发展前景
- 答:分子生物学在医学领域的应用很多,比如说血,血小板,血细胞之类的。
问:我国的转基因农作物(或动物).综述报告..
- 答:现在主要是进口,比如转基因大豆。
本土的不多吧。
问:分子实验报告根据本实验认为影响转化率的因素有哪些
- 答:⑴、受体细胞
转化的受体细胞一般是限制-修饰系统缺陷的突春雀没变株,即不含和甲基化酶的突变株,它可容忍外源进入体内并稳定地遗传给后代。
另外还应根据载体的性质及实验的目的选择合适的宿主。
此外,受体细胞生长状态和密度扒纳也岁码很重要。不要使用经过多次转接或储存于4℃的培养菌。细胞生长密度以刚进入对数生长期时为好,密度过高或不足均会影响。 ⑵、载体DNA和重组DNA方面
载体本身性质决定了转化的高低,不同的载体DNA转化同一受体细胞,其转化效率不同。载体的空间构象也有明显影响,超螺旋结构的载体质粒往往有较高的转化率,经体外酶切连接操作后的载体DNA或重组DNA由于空间上难以恢复,其转化率常比cccDNA低两个。对以质粒为载体的重组分子而言,分子量大的转化效率低。
⑶、操作方面
的制备对转化率影响较大。一般未经特殊处理的培养细胞对重组DNA分子不敏感,难以转化成功。为防止杂菌和杂DNA的污染,整个操作均应在无菌条件下进行,所有器皿最好是新的,并经高压灭菌处理,所有试剂也都要灭菌处理。 ⑷、转化体系中重组DNA的浓度与纯度
转化体系中重组DNA的浓度与纯度对转化率也有一定影响。在一定浓度范围内,浓度越高,转化率越高,重组DNA纯度越高,转化率越高。
⑸、外源基因与宿主染色体的同源性
外源基因来源与宿主亲缘关系越近,越易整合到宿主染色体中,转化率越高,否则易被宿主核酸酶降解而降低转化率。 - 答:⑴、受体细胞
转化的受体细胞一般是限制-修饰系统缺陷的突变株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株,它可容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。
另外还应根据载体的性质及实验的目的选择合适的宿主。
此外,受体细胞生长状态和密度也很重要。不要使用经过多次转接或储存于4℃的培养菌。细胞生长密度以刚进入对数生长期时为好,密度过高或不足均会影响转化率。 ⑵、载体DNA和重组DNA方面
载体本身性质决定了转化的高低,不同的载体DNA转化同一受体细胞,其转化效率不同。载体的空间构象也有明显影响,超螺旋结构的载体质粒往往有较高的转化率,经体外酶切连接操作后的载体DNA或重组DNA由于空间上难以恢复,其转化率常比cccDNA低两个数量级。对以质粒为载体的重组分子而言,分子量大的转化效率低。
⑶、操作方面
感受态细胞的制备对转化率影响较大。一般未经特殊处理的培养细胞对重组DNA分春雀没子不敏感,难以转化成功。为防止杂菌和杂DNA的污染,整个操作均应在无菌条件下进行,所有器皿最好是新的,并经高压灭菌处理,所有试剂也都要灭菌处理。 ⑷、转化体系中重组DNA的浓度与纯度
转化体系中重组DNA的浓度与纯度对转化扒纳率也有一定影响。在一定浓度范围内,浓度越高,转化率越高,重组DNA纯度越高,转化率越高。
⑸、外源基因与宿主染色体的同源性
外源基因来源与宿主亲缘关系越近,越易整合到宿主染色体中,转化率越高,否则易被宿主核酸酶降解而降岁码低转化率。