一、月季对北方根结线虫病抗性分级标准研究(论文文献综述)
李浩林[1](2021)在《腐植酸盐作为阿维菌素水悬浮剂助剂的可行性研究》文中进行了进一步梳理腐植酸类物质是古代生物遗体在漫长的地质运动中形成的一类复杂的有机物质。黄腐酸钾属于腐植酸类物质,目前在农业生产上被广泛应用于叶面肥和功能性水溶肥。目前,这类物质主要用作肥料,未见作为助剂直接用于农药制剂的报道。本研究通过湿法研磨制备以腐植酸类物质为分散剂的10%阿维菌素悬浮剂,以制剂研磨效率及其在冷、热、常温贮存条件下的稳定性为指标,对配方中的分散剂、润湿剂、防冻剂、增稠剂等助剂进行筛选,明确了腐植酸类物质是否可以作为农药分散剂直接添加到制剂配方中,考察并对比了腐植酸钾和黄腐酸钾对阿维菌素原药的分散能力,以分散能力更强的黄腐酸钾为分散剂筛选了的10%阿维菌素悬浮剂的优选配方,并对制剂的各项理化指标进行了测定。之后通过选用不同含量的阿维菌素原药、不同厂家的黄腐酸钾进行阿维菌素悬浮剂的制备,考察了上述优选配方对不同来源阿维菌素和黄腐酸钾的适应性。同时结合室内毒力试验以及田间药效试验评价了以黄腐酸钾为分散剂制备的阿维菌素悬浮剂与商品阿维菌素悬浮剂在应用上的差异。主要结果如下:1、只添加腐植酸钾、黄腐酸钾和木质素磺酸钠制备阿维菌素悬浮剂,将制剂稀释液在显微镜下观察后发现,三个制剂中药剂颗粒均分布均匀,说明腐植酸钾和黄腐酸钾均具有一定的分散能力。之后按照阿维菌素推荐的稀释浓度,将药液稀释到10 mg/L后,发现单独使用木质素磺酸钠以及单独使用黄腐酸钾的两个制剂的药剂颗粒仍然分布均匀,但是单独使用腐植酸钾的制剂稀释液中药剂颗粒发生了严重的团聚现象。此现象说明,腐植酸钾和黄腐酸钾对阿维菌素都具有一定的分散能力,但是相对比来说黄腐酸钾的分散能力更强,在稀释后仍能确保制剂稀释液分散均匀,从而保证制剂的应用效果。2、以黄腐酸钾为分散剂,开发了质量分数为10%的阿维菌素悬浮剂配方,其中分散剂黄腐酸钾添加量为3%,润湿剂OP-10添加量为1%,增稠剂黄原胶添加量为0.15%,硅酸镁铝添加量为0.5%,p H调节剂柠檬酸添加量为0.02%,防冻剂乙二醇添加量为2%,消泡剂X60添加量为0.1%。制剂的各项理化性能也均符合配方的要求,其中制剂的泡沫体积<10 m L,制剂的倾倒性合格,制剂的酸碱度在6.9-7.1之间,制剂的过筛率(细度)≥99%,制剂的悬浮率≥99%,制剂的冷贮稳定性合格,制剂的热贮稳定性合格,制剂有效成分含量为9.91±0.02%,制剂外观呈棕色不透明,制剂热贮后不析水,制剂的流动性较好。而且该优选配方经过多次试验证明,可以制备出性能良好的阿维菌素悬浮剂。3、制剂对不同来源的阿维菌素和黄腐酸钾适应性的考察试验表明,两种不同含量的阿维菌素原药均能用于该优选配方进行悬浮剂的制备,虽然使用有效成分含量为98%的原药得到的制剂析水率更高一些,但是两个制剂的析水率均符合要求,而且两个制剂的其他各项理化指标均无明显差异,符合制剂的要求,该优选配方可以适应不同含量的阿维菌素。该优选配方选用三种不同厂家的黄腐酸钾进行悬浮剂的制备,得到的制剂在粒径上有一定的差异,不同贮藏条件下也呈现出不同的规律,但是整体上制剂粒径均在0.5-5μm之间,符合制剂的要求。并且三个制剂热贮后的析水率也有所不同,使用农大肥业的黄腐酸钾制备的制剂热贮后没有发生析水,使用绿陇生物生产的黄腐酸钾制备的制剂热贮后分层达到了30%左右,使用银海化工生产的黄腐酸钾制备的制剂热贮后分层最为严重,达到了60%左右。三个制剂其他各项的理化性质均符合要求。因此,不同厂家生产的黄腐酸钾作为农药水悬浮剂分散剂的性能有差异。4、室内毒力试验证明,将黄腐酸钾作为分散剂不会影响阿维菌素对南方根结线虫的毒力,试验后12个小时,黄腐酸钾制备的阿维菌素悬浮剂对南方根结线虫的LC50为0.96 mg/L,LC90为1.48 mg/L,商品阿维菌素悬浮剂对南方根结线虫的LC50为0.86 mg/L,LC90为1.54 mg/L;试验后24个小时,黄腐酸钾制备的制剂对南方根结线虫的LC50为0.51 mg/L,LC90为0.79 mg/L,商品阿维菌素悬浮剂对南方根结线虫的LC50为0.51 mg/L,LC90为0.80 mg/L。田间试验表明,施药后90天,黄腐酸钾为分散剂制备的阿维菌素悬浮剂与商品阿维菌素悬浮剂相比较,其对黄瓜根结线虫病的防治效果分别为37.49±4.85%和32.84±5.03%,两制剂处理的黄瓜的根结指数分别44.82±3.11%和48.10±3.57%,没有明显的差异。
王柱华,王文鹏,刘以斌,蒋春和,杨宽,朱有勇,王扬,何霞红[2](2021)在《云南省澜沧县林下三七根结线虫病害调查与侵染来源分析》文中研究说明【目的】明确云南省澜沧县林下有机三七种植基地及育苗基地三七根结线虫病病原种类及来源,为该地区三七根结线虫病的防治奠定基础。【方法】采用系统调查法对澜沧县林下三七种植基地、育苗基地的三七及其周边相同生境下的杂草进行根结线虫病害发生情况调查和病原线虫种类鉴定。【结果】3个基地中大塘子三七育苗基地的根结线虫危害最严重,发病率高达66.82%;其次是林下基地,而哈果马育苗基地危害相对较轻。经收集鉴定,危害林下和育苗基地三七和杂草的病原根结线虫为北方根结线虫(Meloidogyne hapla);在思茅松林下分布杂草97种,其中发生根结线虫病的杂草有紫茎泽兰和积雪草2种,根据杂草的分布丰度和根结线虫寄生的程度可以判断紫茎泽兰是林下三七根结线虫病的主要中间寄主。两育苗基地的杂草类型基本一致,分布杂草124种,其中发生根结线虫病的杂草有溪黄草、紫茎泽兰、鬼针草、六棱菊、豆茶决明、野茼蒿、香薷、一点红、积雪草、草玉梅和豨莶等11种,根据杂草的分布丰度和根结线虫寄生的程度可以判断鬼针草、野茼蒿和紫茎泽兰是三七育苗基地三七根结线虫病的主要中间寄主。【结论】云南省澜沧县林下及育苗基地危害三七及杂草的病原线虫均为北方根结线虫(M. hapla),种苗带病是林下三七根结线虫病发生的主要原因,而苗圃地土壤中的病原线虫来自易感病杂草的富集作用。因此,三七育苗地的选择、育苗和移栽过程中杂草的清除是病害防控的关键。
赵劲捷[3](2020)在《根瘤内生细菌抗南方根结线虫的生物活性研究》文中进行了进一步梳理根结线虫是植物寄生线虫中对各种作物最具破坏性的物种之一,其寄生性强,寄主范围广,繁育周期短且繁殖频率高,给农业生产造成巨大产量损失。生物防治微生物对环境友好且通常对人畜无害,是控制根结线虫病害的一种安全有效措施。本研究从448株根瘤内生细菌分离株中筛选并鉴定出对南方根结线虫有较好防效的生防细菌,通过盆栽和田间试验验证其防效,并研究了其在番茄根部的定殖分布。主要研究结果如下:1.防治南方根结线虫的根瘤内生细菌筛选及防效研究:通过田间初筛试验和盆栽复筛试验筛选出5株对南方根结线虫有较好防效的根瘤内生细菌Sneb1994,Sneb1995,Sneb1997,Sneb2000和Sneb2001。这五株内生细菌显示出高杀线虫活性,处理24 h后二龄幼虫(J2)死亡率皆为85%以上,同时对卵孵化具有抑制作用,并可促进番茄种子萌发及生长。盆栽试验结果表明,五株内生细菌的发酵液灌根处理均能显着减少根结和卵囊数量,并促进番茄植株生长。温室田间防效试验结果显示菌株Sneb1997和Sneb2000的发酵液对番茄根结线虫病有较好防效,并可促进番茄植株生长和提高果实产量。2.有效根瘤内生细菌的鉴定:通过16S rDNA基因序列分析并结合菌株形态特征和生理生化特性对筛选的5株有效内生细菌进行鉴定,鉴定菌株Sneb1994为氧化微杆菌(Microbacterium oxydans),Sneb1995为油菜假单胞菌(Pseudomonas brassicacearum),Sneb1997为防御假单胞菌(P.protegens),Sneb2000为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),Sneb2001为普利茅斯沙雷氏菌(Serratia plymuthica),其中氧化微杆菌(M.oxydans)用于防治根结线虫病尚为首次报道。3.生防菌株Sneb1997和Sneb2001在番茄植株的定殖研究:将含有gfp基因的质粒PMP2444以电击法导入到生防菌株Sneb1997和Sneb2001中,构建可以发出绿色荧光的菌株Sneb1997-gfp和Sneb2001-gfp,标记菌株的生长速率及杀线虫活性与野生菌株相比没有显着差异,且质粒PMP2444在标记菌株中能稳定遗传。标记菌株发酵液灌根处理后可大量定殖于番茄根部,菌株Sneb1997-gfp于15 d种群数量达到最大,每克根为2.41×106 cfu;菌株Sneb2001-gfp的定殖数量低于菌株Sneb1997-gfp,于第10 d种群数量达到最大,每克根为8.79×105 cfu。此外,在番茄茎中也可检测到标记菌株。通过激光扫描共聚焦显微镜观察显示,菌株Sneb1997-gfp优先定殖于番茄根毛和根表,之后在根部表皮细胞、根尖及根部维管束中大量聚集,并在南方根结线虫侵染番茄根部20 d后,于根部巨细胞中观察到菌株聚集;菌株Sneb2001-gfp只在番茄根毛、根表、根部表皮细胞及维管束中观察到。本试验从448株根瘤内生细菌分离株中筛选并鉴定出5株高效生防细菌,其中氧化微杆菌用于防治根结线虫病尚为首次报道,此外菌株Sneb1997和Sneb2001可定殖于番茄根系,研究结果为植物线虫病害的生物防治提供了新的微生物资源。
武超,刘贤文,张炜,王琼,郭华春[4](2020)在《马铃薯不同品种(系)和稻、薯轮作模式对根结线虫病的防治效果》文中进行了进一步梳理根结线虫病是马铃薯连作减产的主要原因之一。为研究根结线虫病的农艺防治措施,本文开展了品种抗性评价、稻、薯轮作和土壤淹水下的线虫消减动态研究。抗性评价试验表明, 18个品种(系)中没有筛选到同时抗南方根结线虫和爪哇根结线虫的材料,品系1002-1和品种丽薯6号相对抗性较好,青薯9号和合作88相对敏感。马铃薯根结线虫发病土壤中可同时检测到卵、幼虫和成虫等不同形态。水旱轮作试验表明,经一茬水稻栽培可使土壤中根结线虫虫态完全消失,再种植马铃薯也不再发生根结线虫病,且马铃薯有效产量显着提高,青薯9号、合作88和丽薯6号的单株有效产量较对照分别提高50.5%、43.7%和26.0%,差异均极显着, 1002-1单株有效产量与对照差异不显着。由此可见,稻、薯轮作根结线虫防治效果明显。为进一步探索水旱轮作的防治机制,观察了土壤淹水进程中各种虫态消减动态。结果表明,在淹水过程中,根结线虫的卵、幼虫和成虫不同虫态此消彼长,要淹水60 d以上,土壤中才检测不到所有形态虫体。水早轮作中水稻生长期淹水时间足够长,满足防治线虫的淹水条件。因此结合抗病品种选用进行稻、薯轮作是防治马铃薯根结线虫病既绿色环保又可持续有效的方法。
傅昱[5](2020)在《桑树对象耳豆根结线虫抗性反应的转录组分析》文中指出桑树是蚕桑产业的物质基础,桑树病害的发生对蚕桑的发展带来严重影响。桑树象耳豆根结线虫病是近几年被发现和报道的病害,有逐渐扩散的趋势,给蚕桑产业带来的经济损失不断增加,因此筛选抗象耳豆根结线虫桑树栽培品种及探究桑树抗象耳豆根结线虫机制对桑树抗病育种有重要意义。本研究鉴定了广东省12个桑树栽培品种对象耳豆根结线虫的抗性程度,并利用转录组测序技术分析了抗、感桑树品种受象耳豆根结线虫侵染后的防御调控机制,为桑树抗病基因的挖掘和抗病品种的选育提供了理论依据。主要研究结果如下:1.桑树品种的抗性鉴定。测定了12个桑树品种受到象耳豆根结线虫侵染后病情指数(DI)、根结指数(GI)、卵粒指数(EI)、繁殖系数(DR)的变化情况。结果显示,各品种接种30天后,DI为20.0077.30;GI为7.1523.70;EI为25.71736.95,DF为0.110.64,不同品种间各项抗性指标的变化情况存在差异。综合DI、GI、EI、RF进行聚类分析,可将桑树品种分为抗病、中感和高感三类,其中,粤桑C44、粤桑C8、粤桑51、粤桑C5、粤桑119为抗病,粤桑87、粤桑119、粤桑C10、283×抗10为中感,粤桑120为高感。以抗性指标中变异系数最大的EI进行聚类分析,结果与四项抗性指标聚类结果一致;再根据抗性指标的隶属函数值总和,确定了供试桑树品种对象耳豆根结线虫的抗性顺序。供试桑树品种抗性由强到弱依次为:粤桑11、粤桑C44、粤桑C8、粤桑51、粤桑C5、粤桑119、粤桑C33、粤桑87、粤桑C10、粤桑110、283×抗10、粤桑120。2.桑树对象耳豆根结线虫抗性反应的转录组分析。通过对42个象耳豆根结线虫侵染后不同时期的抗、感桑树样本进行转录组测序和Denovo组装,共获得55,894条Unigene,其中有33,987条Unigene被注释到Nr、Swissprot、KEGG和KOG数据库。通过对筛选到的抗、感桑树间差异表达基因(DEGs)和关键趋势中的基因进行富集分析,发现DEGs主要富集在细胞激素代谢过程、植物激素信号转导、黄酮类合成、苯丙烷类合成、过氧化物酶、光合作用等通路中。通过对关键趋势做共表达网络分析,发现桑树的抗病性可能与参与生物碱合成的柳叶水甘草碱16-O-甲基转移酶ROMT基因(Unigene0015083)、参与植物免疫过程中一氧化氮累积的zinc-finger转录因子(Unigene0073272)以及参与植物激素信号传导有关的ERF和MYB转录因子(Unigene0004006、Unigene0000628)的表达情况呈正相关。最后,挑选了21个差异基因进行RT-qPCR验证,证明了转录组结果的可靠性。
刘广颖[6](2020)在《防治南方根结线虫生防细菌及其活性挥发物的筛选、鉴定和初步应用》文中研究表明根结线虫(Meloidogyne spp.)是危害农作物的重要病原生物,降低农作物产量和品质,对全球农业造成严重的经济损失。目前,根结线虫病的防治仍以化学防治为主。化学药剂的大量使用对环境安全和人畜健康造成了巨大威胁,多种化学农药也因此被限用或禁用,寻找环境友好、安全、无污染的防治方法迫在眉睫。生防制剂作为一种环境友好的化学药剂替代品逐步引起人们的重视。而生防细菌由于对线虫致死性强,易培养和生产,受到广泛关注。在我国,坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、蜡样芽孢杆菌(B.cereus)和苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)已登记用于防治根结线虫病。但是商品化的优良菌株还比较少,不能完全满足需求,亟待筛选新的高效适用菌株。本研究从线虫病害发生严重的土壤中分离得到106株菌株,优选出8株具有杀线虫活性的菌株,鉴定了其种类,验证了菌株发酵液对根结线虫病的防治效果,鉴定了4株菌株产生的挥发性成分,并初步验证挥发物的杀线虫活性。主要结果概括如下:1.利用浸虫法通过测定菌株发酵液对南方根结线虫的室内毒力,筛选到DDWA、DDWB、DDWC、DDWD、DDWNEI、DDWWAI和JNC 7株菌株具有强杀线虫活性(线虫死亡率≥80%)及JNB 1株具有中等杀线虫活性(50%≤线虫死亡率<80%)。进一步利用熏蒸法确定DDWB、DDWNEI、DDWWAI和JNB 4株可产生具有强杀线虫活性的挥发性成分(线虫死亡率≥80%)。2.通过形态、生理生化和以16S rDNA和gyrB基因序列为引物的分子鉴定方法,确定以上8株细菌分别为耐盐芽孢杆菌B.halotolerans(DDWA)、芽孢杆菌B.kochii(DDWB)、海泥芽孢杆菌B.oceanisediminis(DDWC)、短小芽孢杆菌B.pumilus(DDWD)、东洋芽孢杆菌B.toyonensis(DDWNEI)、蜡样芽孢杆菌B.cereus(DDWWAI)、铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa(JNB)和假蕈状芽孢杆菌B.pseudomycoides(JNC)。3.移栽后混土处理盆栽试验中,海泥芽孢杆菌B.oceanisediminis(DDWC)2倍稀释发酵液(3×1012 CFU mL-1)对根结线虫病的防治效果最高,为69.96%,其次为东洋芽孢杆菌B.toyonensis(DDWNEI),为66.79%。田间试验中,在6×1012 CFU mL-1浓度下,菌株在2018年防效为49.98%-67.47%,其中芽孢杆菌B.kochii(DDWB)的防治效果最高,2019年防效为53.40%-66.79%,其中海泥芽孢杆菌B.oceanisediminis(DDWC)的防治效果最高。发酵液处理后,番茄产量可增加1.38%-26.19%。4.通过熏蒸法法确定4株细菌(B.kochii DDWB、东洋芽孢杆菌B.toyonensis DDWNEI、蜡样芽孢杆菌B.cereus DDWWAI、铜绿假单胞菌P.aeruginosa JNB)存在挥发性活性成分,进一步利用固相微萃取结合气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)推测各成分的种类及结构。鉴定得到挥发性活性成分属于烷烃、苯、酯、苯酚、醛、烯烃、醇、酮、酸和杂环类。5.购买并测定了10种上述挥发性化合物的杀线虫活性。1-十一醇,正辛酸甲酯,仲辛酮和4-氯苯丁酮等4种在小于12 mmol的浓度下,对南方根结线虫的致死率达100%,其LC50值分别为8.70、51.76、66.85、220.26 mg L-1。进行了1-十一醇,正辛酸甲酯和仲辛酮的盆栽熏蒸试验,结果1-十一醇在600 L ha-1的浓度下对根结线虫病的防效高达82.18%,正辛酸甲酯和仲辛酮在3000 L ha-1的浓度下对根结线虫病的防效分别为58.17%和73.98%。
郑婷婷[7](2019)在《生防菌GHt-q6对黄瓜根系土壤微生态及根结线虫的影响》文中进行了进一步梳理由黄瓜连作引起的土壤肥力下降、微生物群落结构单一、病原菌积累等障碍,是影响黄瓜品种和产量的重要原因。其中根结线虫危害大、防治困难成为黄瓜上严重的土传病害之一。近年来研究者们采用微生物菌剂在定植前撒施或者定植后灌根,既能有效控制病害、又有利于农业生产可持续健康发展。本试验以课题组前期筛选、诱变得到的高效突变核桃内生解淀粉芽孢杆菌GHt-q6为材料,采用大田试验研究GHt-q6菌株在黄瓜体内的定殖力、对黄瓜根系土壤微生态的影响和对黄瓜根结线虫病的防效。为进一步制定调整土壤微生态系统和研发黄瓜根结线虫的生防菌剂提供科学依据。本试验主要研究结果如下:(1)对GHt-q6菌株进行利福平诱导得到耐300μg·mL-1利福平的突变菌株记为GHt-q6-Rif,将GHt-q6-Rif菌悬液稀释灌根于黄瓜根围,通过菌落回收法发现GHt-q6-Rif接种10天后可以稳定的定殖于黄瓜植株根、茎、叶,定殖量分别稳定在4.55×104cfu·g-1、3.6×103 cfu·g-1和3.6×102 cfu·g-1,且定殖量根部>茎部>叶部。(2)生防菌GHt-q6菌悬液处理土壤后,前20天对细菌表现出促进作用,对真菌为抑制作用,在第7天细菌菌量是CK的2.67倍,CK真菌菌量是生防菌处理组的2.8倍;处理后20天对放线菌有显着抑制作用,34天CK放线菌量是生防菌处理组3.38倍。高通量测序结果表明,在黄瓜生长前期群落多样性变化不明显,在生长后期细菌群落的多样性增加,具有生防作用的假单胞菌属(Pseudomonas)、单胞菌属(Acidovorax)、荣杆菌属(Lysobacter)始终是土壤中优势菌属。(3)在处理后的前34天对土壤蔗糖酶和脲酶具有显着促进作用,在处理的第3天对脲酶活性最强是CK的1.57倍;在处理第7天蔗糖酶活性最强是CK的1.81倍,之后各处理之间差异不显着;在整个黄瓜生育期对过氧化氢酶影响作用较小。生防菌GHt-q6菌悬液可有效的促进土壤速效磷、速效钾和有机质增加。在苗期对速效磷促进作用最强,是CK的1.43倍;在苗期对速效钾促进作用最强,是CK的2.17倍;在花期和结果期对有机质促进作用最强是CK的1.34倍。(4)通过对不同时期根系土壤中线虫虫口密度的检测和拉秧期对黄瓜的防效调查得出,在结果期和拉秧期两药剂处理组虫口密度与CK差异显着,两种药剂对黄瓜根结线虫的防效差异不显着,生防菌处理组在拉秧期防效达到43.42%。
邢光辉[8](2016)在《烟草抗根结线虫病品种筛选及抗性机理研究》文中指出南方根结线虫病一直是危害烟草较严重的病害之一。目前,防治南方根结线虫病最经济有效的措施是选用抗病烟草品种。本文采用隶属函数值的方法,对烟草的抗病性进行了综合鉴定评价,筛选出了抗病和感病品种;然后以抗病品种G28和感病品种红大为供试材料,分析了不同抗性水平的烟草品种的生理生化变化。本研究的主要结论如下:1.南方根结线虫的侵染引起了烟草生长的显着变化,生长指标的变异系数分别为最高达到22.27%,而抗性指标的变异系数最高是70.82%。利用隶属函数值法,对20种烟草品种的抗病性进行了综合评价,可知数值最大的是G28,抗性最强,最小的为长脖黄,抗性最弱。2.南方根结线虫侵染后,抗病品种G28的超氧根离子(O2-)的生成速率、过氧化氢(H202)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)含量显着高于感病品种红大,但是丙二醛(MDA)含量低于红大;但是不同侵染时期的变化规律差异较大。3.烟草根系中苯丙氨酸解胺酶(PAL)、酪氨酸解胺酶(TAL)和多酚氧化酶(PPO)活性表现出先升高后下降的趋势,且比对照处理显着提高。抗病品种G28中苯丙氨酸解胺酶(PAL)、酪氨酸解胺酶(TAL)和多酚氧化酶(PPO)活性显着高于感病品种。4.南方根结线虫侵染后,抗病和感病烟草接种后还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性显着高于未接种处理;抗病品种G28的还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性高于感病品种红大。抗病品种能够显着增强过氧化氢(H202)清除效率,减轻细胞受氧化损伤程度,提高烟草对根结线虫病的抵抗能力。
回虹燕[9](2016)在《花生根瘤内生细菌的筛选鉴定及对北方根结线虫的毒性研究》文中认为根结线虫(Meloidogyne spp.),可引起农林业生产上的最严重的线虫病害,每年给农作物生产造成了巨大的损失。根结线虫病在我国的花生、番茄、花卉等作物上危害严重。如何寻找安全有效的防治措施控制根结线虫病的为害是目前国际上的研究热点问题。本文以辽宁省危害花生的北方根结线虫(M. hapla)为靶标,从花生根瘤中筛选分离出高毒力菌株,对其进行种类鉴定,并检测其对花生根结线虫病的防治效果,研究结果如下:1.花生的根瘤内生细菌的筛选从全国69个省市地区采集不同生境、植被覆盖和土壤类型的土样495份,种植花生诱集根瘤,以获得种类丰富的根瘤内生细菌种群,诱集共获得根瘤637个。经过初筛获得高效根瘤19株,利用平板稀释法对根瘤内生菌进行分离纯化获得123株根瘤内生细菌,再继续初筛和复筛获得对北方根结线虫二龄幼虫J2有高毒杀作用的内生菌11株,其菌株发酵液对北方根结线虫的卵孵化产生不同程度的抑制作用,抑制率在27.7%-59.4%之间。其中,菌株Sneb1806处理线虫24 h后对J2的致死率最高达到91.4%,其次是菌株Sneb1878,对J2的致死率达到85.7%,菌株Sneb1872致死率也可达到83.9%,而且其发酵液对卵囊孵化相对抑制率最高可达到59.4%。2.花生的根瘤内生细菌的鉴定利用16S rDNA进行碱基序列的同源性比对分析11株高毒力花生根瘤内生细菌的种群进化关系,发现其属于3个类群3个属。3大类群包括假单胞菌科(Pseudomonadaceae)、黄胞单菌科(Xanthomonadace)和根瘤菌科(Rhizobiaceae),其中假单胞菌科(Pseudomonadaceae)有7株,占测序菌株的63.64%,是优势种属。黄胞单菌科(Xanthomonadace)3株和根瘤菌科(Rhizobiaceae)1株,这两个类群内的菌株数量虽然不多,但是充分反映了花生根瘤内生细菌的多样性和群落结构的特征。结合细菌形态学和生理生化特征和16S rDNA基因序列的T载体克隆测序结果,对高毒力菌株Sneb1766、Sneb1777和Sneb1872根据进行了系统鉴定,确定Sneb1766菌株为山羊豆根瘤菌(Rhizobium galegae),Snebl777菌株为嗜根寡氧单胞菌(Stenotrophomonas rhizophila),而Sneb1872菌株为孟氏假单胞菌(Pseudomonas mandelii)且有荧光反应。3.根瘤内生菌防治花生根结线虫病的初步研究 温室盆栽试验,利用细菌发酵液包衣感病品种白沙1016种子,验证11株高毒力菌株对花生上的北方根结线虫侵染的抑制作用。结果显示,与未接线虫的对照处理相比,有5株内生细菌能够显着抑制北方根结线虫对花生的侵染,抑制率超过35%,其中菌株Sneb1777表现出的抑制效果最明显达到50.15%,植株生长旺盛,光合速率增加,并且鲜重和干重明显高于对照,与对照相比差异显着。其次,经过菌株Sneb1766发酵液包衣处理的花生花生根部根系发达,生长较旺盛,对北方根结线虫侵染花生的抑制率达到了35.05%,其生长状况明显好于对照,光合速率增长显着,增加了寄主植物对有效有机物质积累,使花生的鲜重和干重明显增加,推测是具有杀线虫活性的细菌的发酵液通过接触植株根部,侵入到植物内部,作为植物内生菌群的一部分,诱导了植物本身的寄主抗性,使其对北方根结线虫的侵染具有一定的抑制作用,同时改变了寄主植物的某些代谢途径和性状。
蒋春号[10](2016)在《蜡质芽胞杆菌AR156诱导植物对丁香假单胞菌及南方根结线虫抗性机理研究》文中研究说明蜡质芽胞杆菌AR156(缩写为Bc AR156)是本实验室前期从森林树木根围土壤中分离的一株植物根围促生细菌(PGPR),可广谱性防治茄劳尔氏菌引起的蔬菜青枯病、辣椒疫霉引起的疫病、尖孢镰刀菌引起的枯萎病和南方根结线虫引起的根结线虫病。目前该菌株已经获得相关专利,完成全基因组解析,获得防治番茄根结线虫病害的生物农药正式登记证。前期研究发现Bc AR156能够诱导拟南芥产生对丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonassyringae pv.tomato,以下简称Pst)DC3000系统抗性;机理研究表明,Bc AR156诱导拟南芥产生的系统抗性是通过同时激活水杨酸以及茉莉酸/乙烯两条信号通路,同时具有NPR1依赖性。为什么Bc AR156能同时激活拟南芥体内这两条信号通路,而其他生防因子如荧光假单胞菌、部分芽胞杆菌只能激活其中的某一条信号途径?Bc AR156如何被植物体识别,从而激活植物体的系统抗性?在Bc AR156诱导抗性过程中植物内源small RNA的调控作用是什么?除了上述广谱抗病机理外,既然根结线虫与其他病原物的致病机理完全不同,Bc AR156又是如何高效特异性地防治蔬菜根结线虫病害的?这些关于Bc AR156的生防机理问题的解决,将能更有效地推广使用生物农药活菌制剂,推动微生物农药产业的发展。本研究以Bc AR156为生防菌,以拟南芥、番茄为模式植物,以Pst DC3000、南方根结线虫为模式病原,进行三者互作研究,探究生防菌防病机理。本研究首先从转录因子角度出发,清楚地解析了 Bc AR156诱导抗病性机理,最终筛选发现Bc AR156分泌的胞外多糖(EPS)能够作为一种微生物相关分子模式(MAMPs),被植物体表面模式识别受体识别,进而激活植物体自身防卫反应;同时发现植物内源miRNA:miR472和miR825/825*也参与调控Bc AR156诱导系统抗性过程。针对根结线虫的特异性生防机理研究发现,Bc AR156一方面能够改变番茄根系结构,促进番茄根系的快速成熟,从而降低根结线虫对番茄根系的侵染概率;另一方面Bc AR156还能抑制根结线虫某些效应因子编码基因的表达,降低其对番茄的致病力,最终达到高效防治番茄根结线虫的效果。1.转录因子WRKY70和WRKY11在调控蜡质芽胞杆菌AR156诱导系统抗性过程中的作用机理研究以拟南芥为模式植物探寻转录因子WRKY70和WRKY11在Bc AR156诱导系统抗性过程中所起作用。结果表明,Bc AR156处理拟南芥后,能够显着提升植物体内转录因子WRKY70的表达量,同时显着抑制WRKY11的表达。研究还发现转录因子WRKY70和WRKY11为Bc AR156诱导细胞防卫反应以及防卫相关基因的表达所必须。过量表达转录因子WRKY70和WRKY11能够影响Bc AR156诱导拟南芥产生对Pst DC3000的抗性。突变体验证结果显示:Bc AR156诱导抗性的能力在转录因子WRKY70和WRKY11单突变体拟南芥植株中能够保留,但抗性能力略微下降,然而在WRKY70和WRKY11双突变体植株中则完全丧失。以上结果表明,转录因子WRKY70和WRKY11是通过两条不同途径调控Bc AR156诱导系统抗性的,并且这两条途径之间具有协调作用。转录因子WRKY70和WRKY11靶标分析结果表明:WRKY70通过水杨酸信号通路,WRKY11通过茉莉酸信号通路来调控Bc AR156诱导的系统抗性,而且这两条调控通路之间具有NPR1的依赖性。综合上述结果,发现转录因子WRKY70和WRKY11在调控Bc AR156诱导系统抗性过程中起着重要的作用。本研究也是首次从转录因子角度出发,阐明根围有益微生物如何同时激活水杨酸、茉莉酸/乙烯两条信号通路,来诱导寄主植物对病原菌的抗性。2.蜡质芽胞杆菌AR156胞外多糖作为一类MAMPs激活植物系统免疫在诱导系统抗性过程中,植物体对Bc AR156的早期识别起着重要作用。本研究结果表明,Bc AR156分泌的胞外多糖能够诱导拟南芥产生对Pst DC3000的系统抗性;在此过程中,能够提升防卫相关基因PR1、PR2、PR5以及MAPK激酶MPK6的上调表达;另外,也能够激活植物体细胞防卫反应如活性氧爆发、胼胝质沉积以及防卫相关酶活性的提升。基因上位性分析结果显示,Bc AR156胞外多糖仍能够在信号通路突变体jar1、etr1中诱导对Pst DC3000的系统抗性,与野生型Col-0相比,其在突变体jar1、etr1中诱导抗性能力略有降低;在NahG转基因植物以及npr1突变体中,Bc AR156胞外多糖的诱导抗性能力丧失。以上结果表明,Bc AR156胞外多糖诱导的系统抗性依赖MAMPs信号识别和水杨酸信号通路转导,并且具有NPR1依赖性。综上所述,Bc AR156胞外多糖在Bc AR156诱导系统抗性过程中,作为一类MAMPs,发挥着重要的作用。3.Sma11 RNAs在生防菌诱导植物抗病中的调节作用为研究植物内源small RNA在调控植物诱导抗性的机理,本研究利用deep sequencing以及生物信息学技术,筛选获得一些参与调控植物诱导抗性的miRNA。Northern Blot验证试验结果显示,在Bc AR156诱导拟南芥产生对Pst DC3000的抗性过程中,miR472,miR825和miR825*三种miRNA在Bc AR156处理的拟南芥叶片内被显着下调。对上述miRNA靶标预测结果显示,miR472,miR825和miR825*的靶标主要参与植物基础免疫,其中miR825靶标主要一些泛素蛋白连接酶;miR472和miR825*的靶标主要是一些参与ETI途径的R基因。研究发现上述预测的靶基因的表达受到miRNA负向调控。另外,miRNA缺失突变体表现出对病原细菌Pst DC3000的抗性。与此相反,miRNA过表达转基因植株对病原菌更敏感。综上所述,BcAR156通过抑制miR472、miR825和miR825*三种miRNA的表达,引起其靶标基因的上调,从而激活植物体自身的防卫反应,诱使植物产生系统抗性。4.蜡质芽胞杆菌AR156调控植物根系发育防治根结线虫病害的机理研究本研究发现,Bc AR156处理番茄根系能够诱导其结构变化;加速根系的成熟化(如根毛增多,根毛区比例显着增加),从而降低根结线虫进入植物体内的概率;减少植物根系内根结线虫的虫口数,从而获得防治根结线虫的效果。为探究Bc AR156防治根结线虫的机理,我们从植物根系结构发育角度出发,利用转录组学分析技术,探究Bc AR156改变植物根系结构防治根结线虫的分子机理。转录组结果显示,Bc AR156能够引起植物体内一系列与发育相关基因的表达,其中最为显着的是与脱落酸、乙烯、热激蛋白相关的基因,定量PCR验证结果与预测结果相同。综上所述,Bc AR156能够调控一些与脱落酸、乙烯、热激蛋白相关的基因,来调控植物根系的发育;加速根系的成熟化,进而诱导植物抵抗根结线虫的侵染。5.蜡质芽胞杆菌AR156调控根结线虫效应因子表达防治病害的机理研究研究发现利用Bc AR156预处理植物后接种根结线虫,能够显着降低线虫的侵染,为深入探究其生防机理,本研究利用转录组学分析技术进行研究。结果显示,Bc AR156处理能够抑制根结线虫效应因子编码基因的下调表达;Q-RT-PCR验证发现有11个效应因子的表达受到Bc AR156的抑制。本研究首次发现,生防菌能够通过抑制根结线虫效应因子的表达而降低根结线虫的致病力,以达到防治目的。
二、月季对北方根结线虫病抗性分级标准研究(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、月季对北方根结线虫病抗性分级标准研究(论文提纲范文)
(1)腐植酸盐作为阿维菌素水悬浮剂助剂的可行性研究(论文提纲范文)
符号说明 |
中文摘要 |
Abstract |
1 前言 |
1.1 农药剂型及发展方向 |
1.1.1 农药剂型的种类 |
1.1.2 农药制剂的发展方向 |
1.2 农药水悬浮剂 |
1.2.1 水悬浮剂的特点 |
1.2.2 水悬浮剂的地位及发展 |
1.2.3 水悬浮剂的配方组成特点 |
1.2.4 分散剂的种类及选择标准 |
1.2.5 水悬浮剂的物理稳定性 |
1.2.6 水悬浮剂的质量评价指标 |
1.3 腐植酸类物质在农药中的应用 |
1.3.1 腐植酸类物质 |
1.3.2 腐植酸盐在农药中的应用 |
1.4 阿维菌素的理化性质及登记情况 |
1.4.1 阿维菌素的理化性质 |
1.4.2 阿维菌素剂型及登记情况 |
1.5 本研究的研究目的和意义 |
2 材料与方法 |
2.1 药剂和仪器 |
2.1.1 供试药剂 |
2.1.2 供试助剂 |
2.1.3 试验仪器 |
2.1.4 生物试材 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 悬浮剂的制备方法 |
2.2.2 10%阿维菌素悬浮剂的配方筛选 |
2.2.2.1 腐植酸盐对阿维菌素的分散能力的影响 |
2.2.2.2 分散剂种类及用量的筛选 |
2.2.2.3 pH调节剂的筛选 |
2.2.2.4 润湿分散剂种类及用量的筛选 |
2.2.2.5 增稠剂的筛选 |
2.2.2.6 其他组分用量的筛选 |
2.2.2.7 黄腐酸钾分散能力的验证 |
2.2.2.8 优选配方理化性质的测定 |
2.2.2.9 配方稳定性 |
2.2.3 优选配方适应性 |
2.2.3.1 对不同含量阿维菌素原药的适应性 |
2.2.3.2 对不同厂家来源黄腐酸钾的适应性 |
2.2.4 10%阿维菌素悬浮剂的应用效果验证 |
2.2.4.1 室内毒力测定 |
2.2.4.2 田间防治效果 |
2.2.5 数据统计及分析 |
3 结果与分析 |
3.1 10%阿维菌素悬浮剂的配方筛选 |
3.1.1 两类腐植酸盐对阿维菌素原药均具有一定的分散能力 |
3.1.2 黄腐酸钾和腐植酸钾作为分散剂使用的可行性评价 |
3.1.2.1 黄腐酸钾和腐植酸钾对阿维菌素分散能力的比较 |
3.1.2.2 黄腐酸钾最佳添加剂量 |
3.1.3 柠檬酸作为pH调节剂的作用 |
3.1.4 OP-10等作为润湿分散剂对于提高研磨效率的作用 |
3.1.5 增稠剂体系的筛选 |
3.1.6 消泡剂及防冻剂用量的确定 |
3.1.7 黄腐酸钾分散能力的进一步确证 |
3.1.8 10%阿维菌素悬浮剂优选配方的各项理化性质 |
3.1.9 10%阿维菌素悬浮剂制备的批次稳定性 |
3.2 优选悬浮剂配方对不同阿维菌素和不同厂家来源黄腐酸钾的适应性 |
3.2.1 不同厂家来源阿维菌素原药制备制剂的理化性质比较 |
3.2.2 不同来源的黄腐酸钾对阿维菌素悬浮剂析水率的影响 |
3.3 10%阿维菌素悬浮剂的应用效果 |
3.3.1 10%阿维菌素悬浮剂对南方根结线虫的室内毒力与商品制剂相当 |
3.3.2 10%阿维菌素悬浮剂对黄瓜根结线虫病田间防效与商品制剂相当 |
4 讨论 |
4.1 黄腐酸钾具有分散作用能够用于阿维菌素悬浮剂的制备 |
4.2 本研究筛选确定的阿维菌素悬浮剂配方适应性强 |
4.2.1 优选配方对不同含量阿维菌素原药的适应性 |
4.2.2 优选配方对不同厂家黄腐酸钾的适应性 |
4.3 黄腐酸钾制备的阿维菌素悬浮剂的应用效果 |
5 结论 |
6 创新之处及有待解决的问题 |
6.1 创新之处 |
6.2 有待解决的问题 |
参考文献 |
致谢 |
攻读学位期间发表论文情况 |
研究生期间获得奖励 |
(3)根瘤内生细菌抗南方根结线虫的生物活性研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
英文摘要 |
前言 |
第一章 植物内生细菌防治根结线虫病害的研究进展 |
1.1 根结线虫的种类与危害 |
1.1.1 根结线虫的种类与分布 |
1.1.2 根结线虫的发生与危害 |
1.2 根结线虫病的综合防治 |
1.2.1 化学防治 |
1.2.2 农业防治 |
1.2.3 生物防治 |
1.3 植物内生细菌防治植物寄生线虫病害的作用机理研究进展 |
1.3.1 促进植物生长 |
1.3.2 产生杀线虫活性代谢物质 |
1.3.3 营养和空间位点的竞争 |
1.3.4 改变寄主根系分泌物 |
1.3.5 诱导植物系统抗性 |
1.4 根瘤内生细菌防治植物寄生线虫病害的研究进展 |
1.5 问题与展望 |
第二章 防治南方根结线虫的根瘤内生细菌筛选及防效研究 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 供试菌株 |
2.1.2 供试线虫 |
2.1.3 供试番茄品种 |
2.1.4 供试培养基 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 细菌菌株发酵液和发酵滤液的制备 |
2.2.2 南方根结线虫二龄幼虫和卵悬液的制备 |
2.2.3 田间初筛试验 |
2.2.4 盆栽复筛试验 |
2.2.5 菌株发酵滤液对南方根结线虫J2 的毒杀试验 |
2.2.6 菌株发酵滤液对南方根结线虫卵孵化和卵囊孵化的抑制效果 |
2.2.7 菌株固氮和解磷活性检测 |
2.2.8 菌株发酵液对番茄种子萌发的影响 |
2.2.9 菌株发酵液对根结线虫病的盆栽防效试验 |
2.2.10 菌株发酵液对根结线虫病的温室田间防效试验 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 防治南方根结线虫的根瘤内生细菌的筛选结果 |
2.3.2 菌株发酵滤液对南方根结线虫J2 的毒杀活性测定 |
2.3.3 菌株发酵滤液对南方根结线虫卵孵化和卵囊孵化的抑制效果 |
2.3.4 菌株的固氮和解磷活性检测结果 |
2.3.5 菌株发酵液对番茄种子萌发的影响 |
2.3.6 菌株发酵液对根结线虫病的盆栽防效试验 |
2.3.7 菌株发酵液对根结线虫病的温室田间防效 |
2.4 小结 |
第三章 有效根瘤内生细菌的鉴定 |
3.1 试验材料 |
3.1.1 供试菌株 |
3.1.2 供试试剂 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 细菌菌株的形态特征鉴定 |
3.2.2 细菌菌株的生理生化特性鉴定 |
3.2.3 细菌分子生物学(16S rDNA)鉴定 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 菌株形态学特征鉴定结果 |
3.3.2 菌株生理生化特性鉴定结果 |
3.3.3 分子生物学(16S rDNA)鉴定结果 |
3.4 小结 |
第四章 生防菌株Sneb1997和Sneb2001 在番茄根际的定殖分布 |
4.1 试验材料 |
4.1.1 供试菌株 |
4.1.2 质粒 |
4.1.3 供试植物品种 |
4.1.4 供试培养基 |
4.2 试验方法 |
4.2.1 生防菌株的GFP标记 |
4.2.2 GFP标记菌株中的质粒稳定性 |
4.2.3 GFP标记菌株生长速率测定 |
4.2.4 GFP标记菌株对南方根结线虫J2 的毒杀活性测定 |
4.2.5 GFP标记菌株在番茄植株的定殖动态 |
4.2.6 GFP标记菌株在番茄根部的定殖位点 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 菌株Sneb1997和Sneb2001的GFP标记和筛选 |
4.3.2 GFP标记菌株中质粒PMP2444 的稳定性测试 |
4.3.3 GFP标记菌株生长速率测定 |
4.3.4 GFP标记菌株发酵滤液对南方根结线虫J2 的毒杀活性测定 |
4.3.5 GFP标记菌株在番茄植株的定殖数量 |
4.3.6 GFP标记菌株在番茄根部的定殖分布 |
4.4 小结 |
第五章 结论与讨论 |
5.1 防治南方根结线虫的根瘤内生细菌筛选及防效研究 |
5.2 有效根瘤内生细菌的鉴定 |
5.3 生防菌株Sneb1997和Sneb2001 在番茄植株的定殖研究 |
5.4 问题与展望 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
攻读学位论文期间发表文章 |
(4)马铃薯不同品种(系)和稻、薯轮作模式对根结线虫病的防治效果(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 供试材料 |
1.1.1 抗性品种(系)筛选 |
1.1.2 稻、薯轮作 |
1.1.3 土壤淹水下的线虫消减动态研究 |
1.2 试验方法 |
1.2.1 抗性品种(系)筛选 |
1.2.2 稻、薯轮作 |
1.2.3 土壤淹水下的线虫消减动态研究 |
1.3 根结线虫病病情分级标准及抗性标准 |
1.3.1 病情分级标准 |
1.3.2 抗性评价标准 |
1.4 测定项目与方法 |
1.5 数据分析 |
2 结果与分析 |
2.1 抗性品种筛选 |
2.2 水旱轮作对根结线虫防治效果及马铃薯产量的影响 |
2.3 土壤淹水下的线虫消减动态 |
3 讨论 |
(5)桑树对象耳豆根结线虫抗性反应的转录组分析(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
1 前言 |
1.1 桑树及象耳豆根结线虫的概况 |
1.2 桑树根结线虫病病原的研究进展 |
1.2.1 桑树根结线虫病危害状 |
1.2.2 桑树根结线虫病国内外发生情况 |
1.3 植物抗根结线虫侵染的相关机制研究 |
1.3.1 被动抗性 |
1.3.2 主动抗性 |
1.4 转录组测序技术在植物与线虫互作研究中的应用概况 |
1.5 目的意义、研究内容和技术路线 |
1.5.1 目的意义 |
1.5.2 研究内容 |
1.5.3 技术路线 |
2 桑树品种对象耳豆根结线虫的抗性鉴定 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验方法 |
2.1.3 测定指标及计算方法 |
2.1.4 试验数据统计及分析 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 不同桑树品种对象耳豆根结线虫的抗性反应 |
2.2.2 基于GI、EI、RF和DI指标的抗病性评价 |
2.2.3 不同品种桑树抗象耳豆根结线虫能力综合评价 |
2.3 结论与讨论 |
3 象耳豆根结线虫侵染不同抗性桑树品种的转录组分析 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 试验方法 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 样品RNA质量检测结果 |
3.2.2 转录组测序结果 |
3.2.3 Denovo组装结果 |
3.2.4 Unigene功能注释结果 |
3.2.5 DEGs的筛选 |
3.2.6 DEGs的GO富集分析 |
3.2.7 DEGs的Pathway富集分析 |
3.2.8 DEGs的表达趋势 |
3.2.9 关键趋势分析 |
3.2.10 关键趋势的共表达网络分析 |
3.2.11 DEGs的RT-q PCR结果 |
3.3 结论与讨论 |
3.3.1 结论 |
3.3.2 讨论 |
4 全文总结 |
4.1 主要结论 |
4.2 创新点 |
4.3 展望 |
参考文献 |
致谢 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 |
(6)防治南方根结线虫生防细菌及其活性挥发物的筛选、鉴定和初步应用(论文提纲范文)
符号说明 |
摘要 |
Abstract |
1 引言 |
1.1 植物根结线虫病的概况 |
1.2 植物根结线虫病的防治现状 |
1.3 线虫的生物防治资源 |
1.3.1 食线虫真菌 |
1.3.1.1 捕食线虫真菌 |
1.3.1.2 寄生线虫真菌和机会真菌 |
1.3.1.3 产毒真菌 |
1.3.2 生防细菌 |
1.3.2.1 寄生细菌 |
1.3.2.2 根际细菌 |
1.4 芽孢杆菌与假单胞菌在植物根结线虫病害防治中的应用 |
1.4.1 芽孢杆菌与假单胞菌的研究概述 |
1.4.2 利用芽孢杆菌与假单胞菌防治植物根结线虫病的作用机制 |
1.4.3 芽孢杆菌与假单胞菌的应用 |
1.5 本研究的目的与意义 |
2 材料与方法 |
2.1 供试材料 |
2.1.1 供试线虫 |
2.1.2 供试培养基 |
2.1.3 供试土壤 |
2.1.4 供试药剂和化合物 |
2.1.5 供试仪器 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 土壤中细菌菌株的分离 |
2.2.2 具有杀线虫活性的细菌筛选 |
2.2.2.1 细菌发酵液对南方根结线虫的毒力 |
2.2.2.2 细菌挥发物对南方根结线虫的致死活性 |
2.2.3 细菌菌株鉴定 |
2.2.3.1 形态鉴定 |
2.2.3.2 生理生化鉴定 |
2.2.3.3 分子鉴定 |
2.2.4 细菌挥发性化合物试验 |
2.2.4.1 细菌挥发性化合物的成分鉴定 |
2.2.4.2 纯品化合物杀线虫活性的测定 |
2.2.5.3 具有杀线虫活性的纯品化合物的温室盆栽试验 |
2.2.5 细菌发酵液对番茄根结线虫病的防治效果 |
2.2.5.1 盆栽防治试验 |
2.2.5.2 田间防治试验 |
3 结果与分析 |
3.1 具有杀线虫活性的细菌筛选 |
3.1.1 细菌发酵液对南方根结线虫的毒力 |
3.1.2 细菌挥发物对南方根结线虫的致死活性 |
3.2 细菌菌株鉴定 |
3.2.1 形态鉴定 |
3.2.2 生理生化鉴定 |
3.2.3 分子鉴定 |
3.3 细菌挥发性化合物试验 |
3.3.1 细菌挥发性化合物的成分鉴定 |
3.3.2 挥发性化合物的杀线虫活性测定 |
3.3.3 具有杀线虫活性的挥发性化合物的温室盆栽试验 |
3.4 细菌发酵液对番茄根结线虫病的防治效果 |
3.4.1 盆栽防治试验 |
3.4.2 田间防治试验 |
4 讨论 |
4.1 具有杀线虫活性的生防细菌的筛选、鉴定及应用 |
4.2 应用细菌挥发性化合物防治根结线虫 |
5 主要结论与展望 |
5.1 主要结论 |
5.2 创新点 |
5.3 问题不足与研究展望 |
参考文献 |
致谢 |
攻读学位期间发表论文情况 |
(7)生防菌GHt-q6对黄瓜根系土壤微生态及根结线虫的影响(论文提纲范文)
摘要 |
前言 |
1.1 生防菌在植株体内定殖的研究进展 |
1.2 土壤微生态的研究现状 |
1.2.1 土壤微生物多样性研究进展 |
1.2.2 影响土壤微生物多样性的因素 |
1.2.3 土壤微生物多样性的研究现状 |
1.2.4 土壤理化性质研究现状 |
1.3 黄瓜根结线虫病 |
1.3.1 根结线虫发生与危害 |
1.3.2 根结线虫的防治现状 |
1.4 研究目的与意义 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 试验材料 |
1.1.2 供试培养基 |
1.1.3 主要仪器及设备 |
1.2 方法 |
1.2.1 筛选抗利福平菌株 |
1.2.2 GHt-q6-Rif和 GHt-q6菌株处理黄瓜幼苗 |
1.2.3 植株体内GHt-q6-Rif菌株的回收 |
1.2.4 GHt-q6菌悬液对土壤微生物的影响 |
1.2.5 GHt-q6菌悬液土壤酶活性的影响 |
1.2.6 GHt-q6菌悬液对土壤理化性质测定 |
1.2.7 GHt-q6菌悬液对土壤根结线虫虫口密度及防效测定 |
2 结果与分析 |
2.1 生防菌株GHt-q6-Rif在黄瓜体内的定殖分布 |
2.2 生防菌株GHt-q6对土壤微生物数量的影响 |
2.2.1 生防菌株GHt-q6对土壤真菌数量的影响 |
2.2.2 生防菌株GHt-q6对土壤放线菌数量的影响 |
2.2.3 生防菌株GHt-q6对土壤细菌数量的影响 |
2.3 生防菌株GHt-q6对土壤细菌群落多样性的影响 |
2.3.1 测序数据的评估及Alpha多样性指数 |
2.3.2 Alpha多样性指数变化 |
2.3.3 各处理间样本差异性分析 |
2.3.4 属水平物种丰度变化 |
2.4 生防菌对土壤酶活性的影响 |
2.4.1 生防菌株GHt-q6对土壤蔗糖酶活性的影响 |
2.4.2 生防菌株GHt-q6对土壤脲糖酶活性的影响 |
2.4.3 生防菌株GHt-q6对土壤过氧化氢酶活性的影响 |
2.5 GHt-q6菌株对土壤理化性质的影响 |
2.6 生防菌株对黄瓜植株根结线虫的防效 |
3 结论与讨论 |
3.1 生防菌在黄瓜根部的定殖情况 |
3.2 生防菌株GHt-q6对土壤微生物数量的影响 |
3.3 生防菌株GHt-q6对土壤细菌群落多样性的影响 |
3.4 生防菌株GHt-q6对土壤酶活性的影响 |
3.5 生防菌株GHt-q6对土壤化学性质的影响 |
3.6 生防菌株GHt-q6对土壤根结线虫虫口密度及防效影响 |
参考文献 |
Abstract |
致谢 |
(8)烟草抗根结线虫病品种筛选及抗性机理研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1 研究目的和意义 |
1.2 国内外研究进展 |
1.2.1 根结线虫主要种类及优势种群分布情况 |
1.2.2 影响植物根结线虫发病因素 |
1.2.3 植物根结线虫主要防治措施 |
1.2.4 植物抗根结线虫品种鉴定及其评价方法 |
1.2.5 植物抗根结线虫病的生理生化机制研究 |
1.3 研究内容和技术路线 |
1.3.1 研究内容 |
1.3.2 技术路线 |
第2章 抗根结线虫病的烟草品种筛选 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验材料及处理 |
2.1.2 测定指标 |
2.1.3 数据处理 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 南方根结线虫侵染对不同抗性烟草生长指标和抗性指标的影响 |
2.2.2 不同抗性烟草品种对南方根结线虫抗性的综合评价体系 |
2.3 结论与讨论 |
第3章 烟草抗根结线虫病生理机制研究 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 测定指标 |
3.1.3 数据处理 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 南方根结线虫侵染对不同抗性烟草品种活性氧代谢特征的影响 |
3.2.2 南方根结线虫侵染对不同抗性烟草品种苯丙烷类代谢特征的影响 |
3.2.3 南方根结线虫侵染对不同抗性烟草品种谷胱甘肽代谢特征的影响 |
3.3 结论与讨论 |
3.3.1 南方根结线虫侵染对不同抗性烟草品种活性氧代谢特征的影响 |
3.3.2 南方根结线虫侵染对不同抗性烟草品种苯丙烷类代谢特征的影响 |
3.3.3 南方根结线虫侵染对不同抗性烟草品种谷胱甘肽代谢特征的影响 |
第4章 总结 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(9)花生根瘤内生细菌的筛选鉴定及对北方根结线虫的毒性研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
前言 |
第一章 根结线虫病的生物防治及植物内生细菌的研究进展 |
1.1 根结线虫的危害和防治 |
1.2 内生细菌的研究进展及作用机理 |
1.2.1 植物内生菌研究进展 |
1.2.2 豆科植物根瘤形成的一般过程 |
1.2.3 根际细菌、根瘤、植物内生细菌之间的关系 |
1.2.4 植物内生菌的作用机理 |
1.3 植物内生菌防治植物病害研究进展 |
1.3.1 植物内生菌与病原线虫互做研究 |
1.3.2 植物内生菌在植物生产中的应用 |
1.3.3 植物内生菌防治植物病害的前景 |
第二章 拮抗北方根结线虫的花生根瘤内生细菌筛选 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 材料 |
2.1.2 试验方法 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 土壤样品的采集及花生根瘤的获得 |
2.2.2 具杀线活性的根瘤内生细菌的半根瘤法初步筛选 |
2.2.3 内生细菌发酵液对北方根结线虫J2的致死作用 |
2.2.4 初筛的细菌发酵液对北方根结线虫卵孵化的影响 |
2.2.5 初筛的细菌发酵液对花生的促生作用 |
2.2.6 培养基筛选固氮菌 |
2.2.7 花生根瘤内生细菌遗传多样性研究 |
2.3 小结 |
第三章 生防细菌对花生根结线虫病的防效试验 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 材料 |
3.1.2 试验方法 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 具有毒杀作用菌株的温室防效 |
3.2.2 对花生植株生长情况的影响 |
3.2.3 对光合作用的影响分析 |
3.3 小结 |
第四章 高效根瘤内生细菌的鉴定 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 供试材料 |
4.1.2 试验方法 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 形态学特征 |
4.2.2 生理生化特性反应 |
4.2.3 克隆测序结果分析 |
4.2.4 目的细菌菌株的药物敏感性 |
4.3 小结 |
第五章 结论与讨论 |
5.1 拮抗北方根结线虫的花生根瘤内生细菌筛选 |
5.2 根瘤内生细菌菌株的温室盆栽防效试验 |
5.3 北方根结线虫生防细菌的鉴定 |
参考文献 |
致谢 |
附录 |
攻读硕士学位期间发表学术论文 |
(10)蜡质芽胞杆菌AR156诱导植物对丁香假单胞菌及南方根结线虫抗性机理研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
上篇 文献综述 |
第一部分 文献综述 |
第一章 微生物防治植物病害的机理研究进展 |
第一节 |
1 国内外芽胞杆菌的研究及其应用现状 |
1.1 国内芽胞杆菌的生防研究概况 |
1.2 国外芽胞杆菌的生防研究进展 |
2 芽胞杆菌生防机理研究 |
2.1 抗菌作用 |
2.2 溶菌作用 |
2.3 竞争作用 |
2.4 诱导系统抗病性 |
3 芽胞杆菌在农业生产应用中面临的问题及解决途径 |
3.1 芽胞杆菌生物农药面临的问题 |
3.2 针对芽胞杆菌生物农药问题的解决方法 |
3.3 芽胞杆菌生物农药未来发展展望 |
第二节 蜡质芽胞杆菌生防机理研究进展 |
1 国内外芽胞杆菌的研究及应用现状 |
2 蜡质芽胞杆菌生防机理研究 |
2.1 竞争作用 |
2.2 拮抗作用 |
2.3 诱导系统抗病性 |
3 问题与展望 |
第二章 植物防卫系统与诱导抗性 |
第一节 植物防卫系统与诱导抗性概述 |
1 根围免疫信号 |
2 植物系统获得性抗性(SAR) |
3 诱导系统抗病性(ISR) |
4 关键调控因子 |
4.1 NPR1调节因子 |
4.2 WRKY转录因子 |
4.3 植物诱导抗病过程中的Priming |
第二节 微生物胞外多糖的功能研究概述 |
1 多糖的种类 |
1.1 按照多糖的来源 |
1.2 按照微生物分泌的多糖部位 |
2 微生物胞外多糖的生物活性 |
2.1 保护作用 |
2.2 识别作用 |
2.3 储存能量 |
2.4 粘合作用 |
2.5 提升机体免疫力 |
2.6 抑制肿瘤细胞生长 |
3 微生物胞外多糖的应用 |
3.1 微生物胞外多糖在农业领域内的应用 |
4 总结 |
第三节 Small RNAs在植物内源免疫中的调控作用 |
1. 参与small RNAs合成的基本成分及作用 |
1.1 Dicer酶 |
1.2 AGO蛋白 |
1.3 RNA依赖性RNA聚合酶 |
2 Small RNAs的种类及生物合成 |
2.1 microRNAs的生物合成 |
2.2 siRNAs的生物合成 |
3. Small RNAs的作用机制 |
4. Small RNAs在植物内源免疫中的抗病作用 |
5. 总结 |
第三章 蔬菜根结线虫病害综合防治研究进展 |
1 根结线虫的分类学地位 |
2 根结线虫的发生规律 |
3 根结线虫的寄主范围和传播途径 |
4 根结线虫的为害特点及症状 |
5 根结线虫病害的防治策略 |
5.1 农业防治措施 |
5.2 物理防治措施 |
5.3 化学防治措施 |
5.4 生物防治措施 |
6 目前根结线虫防治中存在的问题及发展前景 |
第四章 根结线虫病害的生防机理研究进展 |
1 根结线虫病害的生防机理 |
1.1 寄生作用 |
1.2 捕食作用 |
1.3 毒杀作用 |
1.4 诱导植物产生系统抗病性 |
2 问题和展望 |
第五章 植物线虫效应因子在调控病害防治过程中的作用研究 |
1 线虫效应因子注入寄主植物细胞的调控 |
2 线虫效应因子作为植物细胞生物学的探针 |
2.1 细胞周期与骨架 |
2.2 细胞壁结构 |
2.3 新陈代谢 |
3 效应因子的功能性研究 |
3.1 基因沉默 |
3.2 寄主靶标识别 |
4 线虫效应因子分类 |
5. 线虫效应因子的识别研究 |
6 线虫效应因子在全球范围内的研究进展 |
参考文献 |
下篇 研究内容 |
第二部分 研究内容 |
第一章 转录因子WRKY70和WRKY11在调控蜡质芽胞杆菌AR156诱导系统抗性过程中的作用机理研究 |
1 材料与方法 |
1.1 供试植物 |
1.2 供试菌株 |
1.3 培养基 |
1.4 转录因子WRKY11与WRKY70基因克隆及过表达载体构建过程 |
1.5 转录因子WRKY11与WRKY70基因过表达拟南芥以及转录因子WRKY11,WRKY70双突变体植株的构建 |
1.6 植物内源水杨酸、茉莉酸含量检测 |
1.7 引物信息 |
1.8 转录因子WRKY11与WRKY70亚细胞定位 |
1.9 Bc AR156对拟南芥促生作用表型测定 |
1.10 Bc AR156诱导拟南芥对Pst DC3000抗病性表型测定 |
1.11 Bc AR156诱导拟南芥对Pst DC3000抗病性的分子水平检测 |
1.12 Bc AR156诱导拟南芥对Pst DC3000抗病性的细胞水平检测 |
1.13 Western blot |
1.14 统计分析 |
2 结果与分析 |
2.1 转录因子WRKY11和WRKY70参与调控Bc AR156诱导系统抗性 |
2.2 转录因子WRKY11和WRKY70都定位于细胞核 |
2.3 转录因子WRKY11和WRKY70参与调控Bc AR156诱导拟南芥产生的系统抗性 |
2.4 转录因子WRKY11和WRKY70参与调控Bc AR156诱导拟南芥内细胞防卫反应 |
2.5 转录因子WRKY11和WRKY70是Bc AR156诱导拟南芥内防卫相关基因的上调表达所必需的 |
2.6 转录因子WRKY11和WRKY70靶标基因在Bc AR156诱导拟南芥产生的系统抗性过程中的表达情况 |
2.7 水杨酸、茉莉酸/乙烯信号通路,以及NPR1参与转录因子WRKY11和WRKY70调控Bc AR156诱导的系统抗性 |
2.8 Bc AR156诱导拟南芥产生的系统抗性并非通过影响植物内源激素的合成 |
3 讨论 |
第二章 蜡质芽胞杆菌AR156胞外多糖作为一类MAMPS激活植物系统免疫 |
1 材料与方法 |
1.1 供试植物 |
1.2 供试菌株 |
1.3 培养基 |
1.4 Bc AR156胞外多糖的提取与纯化 |
1.5 过敏性反应(HR)分析 |
1.6 Bc AR156各组分对Pst DC3000的平板拮抗试验 |
1.7 蜡质芽胞杆菌胞外多糖诱导抗性表型验证试验 |
1.8 Pst DC3000在拟南芥上的定殖量测定 |
1.9 Bc AR156胞外多糖诱导拟南芥对Pst DC3000抗病性的细胞水平的检测 |
1.10 拟南芥总RNA提取与Q-RT-PCR分析 |
1.11 拟南芥叶片总蛋白的提取与Western blotting分析 |
1.12 统计分析 |
2 结果与分析 |
2.1 Bc AR156胞外多糖能够诱导植物产生过敏性反应 |
2.2 Bc AR156胞外多糖诱导拟南芥产生对Pst DC3000的系统抗性 |
2.3 Bc AR156胞外多糖诱导拟南芥防卫相关基因的表达 |
2.4 Bc AR156胞外多糖激活植物体免疫诱导活性氧的积累、胼胝质的沉积以及防卫相关酶活性增加 |
2.5 AR156胞外多糖在拟南芥中诱导的系统抗性通过SA信号途径,并依赖NPR1 |
2.6 Bc AR156胞外多糖在拟南芥中诱使的系统抗性通过MAPK信号途径。 |
2.7 Bc AR156胞外多糖的化学分析及结构鉴定 |
3 讨论 |
第三章 SMALL RNAS在生防菌诱导植物抗病中的调节作用 |
1 材料与方法 |
1.1 供试植物 |
1.2 供试菌株 |
1.3 培养基 |
1.4 转基因植物的构建 |
1.5 Bc AR156诱导拟南芥对Pst DC3000抗病性表型测定 |
1.6 miRNA靶基因的预测 |
1.7 拟南芥总RNA提取与Q-RT-PCR分析 |
1.8 Northern Blot |
1.9 统计分析 |
2 结果与分析 |
2.1 miRNA参与调控Bc AR156诱导拟南芥产生对Pst DC3000系统抗性 |
2.2 miR472,miR825/825*参与调控Bc AR156激活的ISR |
2.3 miR472、miR825/825*过表达或者缺失能够影响植物基础免疫 |
2.4 miR472、miR825/825* target植物内源R基因,调控植物基础免疫 |
3 讨论 |
第四章 蜡质芽胞杆菌AR156调控植物根系发育防治根结线虫病害的机理研究 |
1 材料与方法 |
1.1 供试植物 |
1.2 供试菌株 |
1.3 培养基 |
1.4 根结线虫二龄幼虫(J2)悬浮液的制备 |
1.5 蜡质芽胞杆菌引起番茄根系变化观察 |
1.6 线虫对番茄根系侵染率检测 |
1.7 温室防效实验 |
1.8 转录组测序与分析 |
1.9 番茄根组织总RNA提取与Q-RT-PCR分析 |
2 结果与分析 |
2.1 Bc AR156高效防治番茄根结线虫病 |
2.2 Bc AR156诱导番茄根系结构变化,加速番茄根系得成熟化 |
2.3 Bc AR156诱导番茄根系结构变化,降低根结线虫侵染 |
2.4 Bc AR156调控番茄根系相关基因的表达 |
2.5 转录组学预测相关调控基因Q-RT-PCR验证 |
3 讨论 |
第五章 蜡质芽胞杆菌AR156调控根结线虫效应因子表达防治病害的机理研究 |
1 材料与方法 |
1.1 供试植物 |
1.2 供试菌株 |
1.3 培养基 |
1.4 根结线虫二龄幼虫(J2)悬浮液的制备 |
1.5 转录组测序与分析 |
1.6 效应因子分析和预测 |
1.7 番茄根组织总RNA提取与Q-RT-PCR分析 |
2 结果与分析 |
2.1 转录组测序结果分析 |
2.2 Q-RT-PCR结果验证 |
3 讨论 |
参考文献 |
全文总结及展望 |
攻读学位期间发表的学术论文与专利 |
致谢 |
四、月季对北方根结线虫病抗性分级标准研究(论文参考文献)
- [1]腐植酸盐作为阿维菌素水悬浮剂助剂的可行性研究[D]. 李浩林. 山东农业大学, 2021
- [2]云南省澜沧县林下三七根结线虫病害调查与侵染来源分析[J]. 王柱华,王文鹏,刘以斌,蒋春和,杨宽,朱有勇,王扬,何霞红. 云南农业大学学报(自然科学), 2021(01)
- [3]根瘤内生细菌抗南方根结线虫的生物活性研究[D]. 赵劲捷. 沈阳农业大学, 2020(08)
- [4]马铃薯不同品种(系)和稻、薯轮作模式对根结线虫病的防治效果[J]. 武超,刘贤文,张炜,王琼,郭华春. 作物学报, 2020(09)
- [5]桑树对象耳豆根结线虫抗性反应的转录组分析[D]. 傅昱. 仲恺农业工程学院, 2020(07)
- [6]防治南方根结线虫生防细菌及其活性挥发物的筛选、鉴定和初步应用[D]. 刘广颖. 山东农业大学, 2020(11)
- [7]生防菌GHt-q6对黄瓜根系土壤微生态及根结线虫的影响[D]. 郑婷婷. 山西农业大学, 2019(07)
- [8]烟草抗根结线虫病品种筛选及抗性机理研究[D]. 邢光辉. 湖南农业大学, 2016(09)
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